2017 Fiscal Year Research-status Report
黄体形成ホルモンの尿道機能への作用機序の解明と新規治療薬の開発
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17K11173
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
海法 康裕 東北大学, 医学系研究科, 非常勤講師 (30447130)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
川守田 直樹 東北大学, 大学病院, 助教 (00617524)
荒井 陽一 東北大学, 医学系研究科, 教授 (50193058)
中川 晴夫 東北大学, 医学系研究科, 非常勤講師 (80333574)
泉 秀明 東北大学, 医学系研究科, 助教 (80722545)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 腹圧性尿失禁 / 黄体形成ホルモン / 女性ホルモン / 尿道括約筋 / 尿禁制反射 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、腹圧性尿失禁を増悪させているのではエストロゲン減少ではなく、LH上昇であるとの仮説を検証するためにおこなっている。平成29年度はLH上昇による尿道括約筋機能への影響とGnRHアンタゴニスト投与による尿道括約筋機能の変化について研究をおこなった。メスSDラットを用いて卵巣摘除によりLHが上昇することを確認のうえ、病態モデル（卵巣摘除によりLHを上昇させた状態のラット：OVX群）、治療モデル（卵巣摘除後にGnRH antagonistを投与しLHを低下させた状態のラット：OVX+G群）、コントロール2群（開腹のみ、開腹＋GnRH antagonist投与）の４群のモデルを作成し、ホルモン状態の安定する6週後に尿道機能の評価としてくしゃみ誘発尿禁制反射実験を行った。くしゃみ誘発尿禁制反射は、ラットのくしゃみ時に尿禁制のために誘発される尿道括約筋収縮を記録し振幅（A-URS）と尿道基線圧（UBP）を評価した。6週後のUBPは、OVX群ではSham群と比べ有意な低下を認めた一方で、OVX+G群ではOVX群と比べてUBPの有意な上昇を認めた。6週後のA-URSは、OVX群ではSham群と比べて有意な低下を認めた一方で、OVX群とOVX+G群には有意な差はなかった。LH上昇によってUBPが低下し、LH低下によってUBPが改善することが示唆された。一方で、LH低下はA-URSを変化させなかった。くしゃみ誘発尿禁制反射におけるUBPは尿道平滑筋活動を、A-URSは尿道括約筋活動を反映していることにより、LHは尿道平滑筋に主に作用し尿禁制に影響を与えていると考えられた。本年度の結果から、腹圧性尿失禁を増悪させるのはLH上昇であるとの仮説をラット生理実験において証明できたと考えられる。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
平成29年度に予定であった、１. LH上昇による尿道括約筋機能への影響、2. GnRHアンタゴニスト投与による尿道括約筋機能の変化を評価するラット生理実験が順調に行われた。当初の予測としては、LH上昇による尿失禁悪化のメカニズムとして尿道括約筋活動を反映するA-URSと尿道平滑筋活動を反映するUBPの両者の減弱を予想していたが、結果はGnRH antagonist投与によって尿道平滑筋活動を反映するUBPは有意差をもって回復したのに対し、A-URSの回復に有意差を得られなかった。このGnRH antagonist投与に対するA-URSの変化に関しては予想外の結果ではあったが、UBPの減弱・回復を確認できたことで、LH上昇が尿道括約筋機能を低下させる、すなわち、尿失禁の増悪させるといった仮説は間違っていないと判断され、平成30年度以降の実験につながるものであった。
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| Strategy for Future Research Activity |
GnRHアンタゴニスト投与による尿道括約筋機能の変化を評価するラット生理実験で本年度の結果として、LH上昇による尿禁制悪化の機序として、A-URSとUBPの両者の減弱を予想していたが、UBPは有意差をもってOVXにより低下およびGnRHアンタゴニスト投与によって回復していたが、A-URSではGnRHアンタゴニスト投与による回復に有意差を得られなかった。UBPが通常の尿道内圧を示すパラメーターである一方、A-URSは急激な腹圧上昇に反射的に対応する尿道内圧上昇であり、いずれも腹圧性尿失禁における独立した重要なパラメーターと考えており、A-URSの回復に有意差がでなかったことは予想外の結果であった。しかしながら、実験を通しての全体的な印象として、OVX群に比べてOVX+G群のA-URSは高値であり、本当に有意差がないのか、すなわち、LH上昇に対してA-URSは影響を受けないのかに関しては、確認のため追加実験が必要だと考えている。有意差がでなかった原因として、ラット数の問題、卵巣摘除から実験までの期間の影響などが考えられ、ラット数をふやしての結果の再検討。および、卵巣摘除からもう少し遅い（あるいは早い）時期でのくしゃみ誘発反射の検討を加えて、本年度結果の確認をする方針である。それと並列して、組織学的・分子生物学的な検討、すなわち、1)qPCR法によるLH受容体のmRNA発現量の比較検証、2)ウェスタンブロットによるLH受容体タンパクの比較検討、3)組織染色・免疫染色による括約筋筋肉量の比較検討、4)蛍光免疫染色によるLH受容体の局在の比較検討、5)LH上昇による尿道括約筋における下流カスケードの検索を予定通り順次着手し、生理実験の結果の裏付けをとっていく予定である。
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| Causes of Carryover |
適任の実験補佐が雇えず、研究補助のための人件費がかからなかった。実験、データー解析はすべて自分たちでおこなったため次年度使用額が生じた。しかしながら、次年度は仕事の効率化のために実験補佐を雇う予定であるため、GnRHアンタゴニスト投与による尿道括約筋機能の変化に関わる研究の人件費として次年度使用額を使用する計画である。
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Research Products
(1 results)
