Investigation of polybacterial onset model of tonsillitis repetition and severity by crowd analysis of tonsil crypt microflora

2018 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 17K11400
• Research Institution: Wakayama Medical University
• Principal Investigator: 平岡 政信 和歌山県立医科大学, 医学部, 助教 (80423945)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 杉田 玄 和歌山県立医科大学, 医学部, 博士研究員 (20407274) ; 河野 正充 和歌山県立医科大学, 医学部, 助教 (20511570) ; 保富 宗城 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (90336892)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: microbiota / 扁桃炎 / GAS

Outline of Annual Research Achievements

平成30年度は、”急性扁桃炎患者の扁桃陰窩細菌叢の把握（扁桃陰窩細菌叢の把握と乳酸菌定着）”および、反復性扁桃炎患者の扁桃マイクロビオーム解析によ
る反復化機序の検討のため基礎実験をおこなった。扁桃炎発症、遷延化、反復化機序における多細菌性発症を検証するため、宿主、病原細菌、常在菌のクロス
トークの検討が必要となる。
3者相互作用の一要因である、宿主要因としてのcarbonhydrate utilization geneの発現の有無を評価するため、代謝経路解析、メタボローム解析を目標としたwet, dry手技の文献的検索を行った。特にプライマーの選定、抽出DNA濃度とPCR増殖効率、実験条件と検体採取方法について検討を加えた。
同じく、”反復性（重症）扁桃炎患者の扁桃陰窩細菌叢の把握（反復性扁桃炎におけるGAS細胞内寄生）”についても基礎的な検討を加えた。3者相互作用の一要因である、病原細菌要因としてのGAS基準株のヒト培養上皮への感染と、細胞内寄生を評価するin vitro実験系の確立を検討した。特に、細胞培養の安定的な維持をもたらす実験条件、研究室設備の整備と、GAS増殖曲線を用いて培地の選定、培養温度条件の比較検討をおこなった。また、in vivo実験系の準備として、マウス扁桃炎モデルの文献的検索を行い飼育条件の比較検討を動物実験施設とともに検討した。特にマウス系統維持のための飼育環境と食餌内容、清掃頻度などを調整した。現在アメリカ留学にて基礎研究を行っている、帰国後再開を予定している。