アクアポリンを標的とした黄斑浮腫の新規治療戦略

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 17K11450
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 白神 史雄 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 教授 (50187530)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 且原 真木 岡山大学, 資源植物科学研究所, 教授 (00211847) ; 森實 祐基 岡山大学, 大学病院, 講師 (50432646)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: アクアポリン

Outline of Annual Research Achievements

加齢や生活習慣病に伴う様々な眼疾患(糖尿病網膜症、網膜静脈閉塞症、加齢黄斑変性、黄斑上膜)において、網膜の中心部(黄斑)に細胞間質液が過剰に貯留した状態を黄斑浮腫といい、重篤な視力障害の原因となる。現在黄斑浮腫に対しては、薬剤、網膜光凝固、手術等、網膜血管の透過性亢進を阻害する治療が行われている。しかし治療効果に限界があり新たな治療法の開発が必要である。本研究では、細胞間質液の恒常性維持に重要な膜タンパクであるアクアポリン(AQP)に着目し、AQPの発現や機能を調節することによって黄斑浮腫を改善できるのではないかとの仮説を立てた。本研究では黄斑浮腫の病態におけるAQPの発現や機能変化を明らかにする。そして、AQPの発現や機能調節が黄斑浮腫に及ぼす影響を明らかにし、新たな治療法開発の基盤となる成果を得る。本年度は、網膜色素上皮細胞及びミュラー細胞を培養し、細胞に伸展ストレスを加えた場合の、細胞のmRNA及び蛋白発現について検討した。はじめに、細胞伸展システムに使用可能な、シリコーン製細胞培養チャンバーのコーティング方法について検討し、各細胞が生着し伸展刺激に耐えることが可能な条件を見出した。その上で、細胞に種々の伸展刺激を与え、AQPやタイトジャンクションに関連する膜タンパクやサイトカインの発現の変化について、PCR法で検討した。今後は蛋白レベルにおける発現変化について、western blotting法で検討する予定である。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

細胞種によっては、伸展刺激に耐えることが出来ないことが判明し、培養条件の検討や細胞チャンバーのコーティングの条件設定に時間を要したため。

Strategy for Future Research Activity

生着が難しい細胞については、チャンバーの種々のコーティング剤を試してみる。また、チャンバーの大きさ、伸展刺激の強さ、周期についてもさらなる検討を行う。

Causes of Carryover

実験消耗品が予定よりも少なく済んだため次年度使用額が生じた。次年度には実験消耗品がより必要になるため、次年度に使用する計画である。