Development of pharmacotherapy targeting TGF beta /Smad for skin scarring

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 17K11588
• Research Institution: Wakayama Medical University
• Principal Investigator: 木田 真紀 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (00326381)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: オステオポンチン / 皮膚 / 創傷治癒 / TGF-ｂ

Outline of Annual Research Achievements

Mouse embryonic fibrobrast (MEF）を用い、TGFβ1 とSLAYGLR の相互作用の検討した。MEFはWTマウスとオステオポンチンノックアウト（KO）マウスの胎児をトリプシンで処理し作成した。SLAYGLR投与群およびTGF－b1投与群にて以下の項目を調査した。

1.Real-time RT-PCR; Real-time RT-PCRにてaSMA、コラーゲンIα1、およびリン酸化Smad2を測定した。KOマウスにてSLAYGLR（-）+TGF-b1（+）群ではaSMA、コラーゲンIα1、およびリン酸化Smad2の発現は低下していた。一方、SLAYGLR（+）+TGF-b1（+）群ではSLAYGLR（-）+TGF-b1（+）群に比べ、明らかにその発現は増強していた。
2.Western blot; Western blot にてコラーゲンIα1、およびリン酸化Smad2の発現を検討した。上記と同様にKOマウスにてSLAYGLR（-）+TGF-b1（+）群ではaSMA、コラーゲンIα1、およびリン酸化Smad2の発現は低下しており、SLAYGLR（+）+TGF-b1（+）群では促進していた。以上より、SLAYGLRはTGF-ｂ1シグナルを調節する機能を持っている可能性があると考えられた。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

MEF作成において、繊維芽細胞以外の細胞を共培養していることが多く、MEFモデル作成に時間を要した。また、KOマウスのMEFは感染に弱く、真菌感染するここがあり、研究が遅れる原因となった。

Strategy for Future Research Activity

動物保護の観点より、まずは細胞レベルにおけるモデルを確立し、研究結果を考察したのちに動物実験を施行する予定である。

Causes of Carryover

In vitroでの細胞モデルの確立が難しく、研究が遅れているため、使用額に差額が生じた。