2018 Fiscal Year Research-status Report
iPS細胞由来間葉系幹細胞を用いた広域顎骨組織欠損再生に向けた基礎的研究
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17K11770
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| Research Institution | Osaka Dental University |
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Principal Investigator |
橋本 典也 大阪歯科大学, 歯学部, 准教授 (20228430)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
馬場 俊輔 大阪歯科大学, 歯学部, 教授 (40275227)
本田 義知 大阪歯科大学, 歯学部, 准教授 (90547259)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | iPS細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
申請者らはすでに、口腔軟組織由来iPS細胞の樹立を終え、iPS細胞由来の間葉系前駆(様)細胞(iPSMSLC)への誘導も成功した。本申請では、iPS細胞からiPSMSLCのさらなる樹立効率を高める培養法を見出すとともに、iPSMSLCの安全性をゲノム異常と造腫瘍性とを関連させて明らかにする。
理化学研究所バイオリソースセンターより譲渡された皮膚由来iPS細胞（409B2）を使用した。作製したiPSMSLCから骨芽細胞へと分化させる条件を探索した。骨分化培地を用い、21日間培養し、リアルタイムPCR法とアリザリンレッド染色によって骨芽細胞分化能を評価した。またiPSMSLCから分化誘導した細胞はReal-time PCRにおいて、コントロール群と比較して、BMP-2添加群では、ALPは1、3週目で、COL1-A1は1週目で最も高かった、Runx2、 OCNでは上記マーカーと異なる発現挙動を示した。BMP-2添加群のALP活性では2週目で最も高い発現を示し、3週目では発現が低下し、OCNでは3週目で高い発現を示した。フローサイトメトリーの結果、iPSMSLCはMSC同様表面マーカーをもった細胞であり、未分化の細胞が極めて少ないことが明らかとなった。さらにiPSMSLCの骨芽細胞様細胞への分化が確認できた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
フローサイトメトリーの結果、作製したiPSMSLCはMSC同様表面マーカーをもった細胞であり、未分化の細胞が極めて少ないことが明らかとなった。さらにiPSMSLCの骨芽細胞様細胞への分化が確認できたから。
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| Strategy for Future Research Activity |
他のフィーダーフリー培養法によってiPS細胞からiPSMSLCのさらなる樹立効率を高める培養法を見出す。
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| Causes of Carryover |
動物実験に関わる費用が少なく、国際学会への参加もなかったことから未使用額が多かった。
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