2018 Fiscal Year Research-status Report
The development of diagnostic tool for severe fever with thrombocytopenia syndrome (SFTS) in a SFTS-endemic area in Japan.
| Project/Area Number |
17K15778
|
|---|
| Research Institution | University of Miyazaki |
|---|
Principal Investigator |
松田 基弘 宮崎大学, 医学部, 助教 (90770149)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
|
| Keywords | 重症熱性血小板減少症候群 / SFTS抗体 / SFTS抗原 / マダニ媒介感染症 / ELISA / イムノクロマトグラフ法 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
SFTS感染症の診断に使用可能な免疫血清学的な測定法を開発するため、現在までに以下の研究を実施した。2017年度までに①SFTSの核蛋白質(NP)を大腸菌発現ベクターに組換え、大腸菌で組換え蛋白質を発現させた。②この組換え蛋白質を用いてウエスタンブロットを実施しSFTS既往患者血清の全例からNPに対する特異抗体が検出し、患者抗体の検出に使用できることを確認した。③精製した組換えNPを抗原にしたdouble antigen ELISA法を作成し、SFTS感染初期より経時的に採取した数例の血清について調べた結果、感染初期よりNPに対する抗体が検出され、SFTSの診断に有効な可能性を示した。④さらに組換えNPを免疫源としてウサギに免疫して、アフィニティ精製抗NP抗体の精製も成功した。2018年度はこの精製NP蛋白およびアフィニティ精製ウサギ抗NP抗体を用いてdouble antigen immunochromatography assayを作成した。この方法を用いることでSFTS患者の時系列血清から回復後のみならず、急性期においても抗体が検出されることが判明し、RT-PCR法と組み合わせて用いることで、患者の診断に寄与できる可能性が示された。また本方法はベッドサイドで簡便に検査を行うことができ、さらにdouble antigen法は動物種を選ばないため、疫学調査にも有用である可能性がある。これらのことから、宮崎大学より特許の申請を行った。またアフィニティ精製ウサギ抗NP抗体を用いて患者血清中のウイルス蛋白（抗原）の検出が可能かどうかについても基礎的な検討を開始した。以上の通り当初の研究計画どおり進行している。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
SFTS患者の抗体検出法として、組換えSFTS抗原を作成し高い特異性を有する高感度の抗体測定法を確立した。本法は臨床応用に十分耐えうると考えられる。さらに同じ組換え抗原を用いてベッドサイドで実施可能なdouble antigen immunochromatography assayも開発した。
|
| Strategy for Future Research Activity |
本研究で開発したSFTS抗体検出法が臨床応用可能か多数例のSFTS患者血清で検証する。また、近年野生動物およびイヌやネコのようなペット動物からもSFTSウイルスが検出されており、人への感染も問題となっている。本研究で開発しているdouble antigen法は2次抗体を使用しないため様々な動物種に応用可能であり、動物を対象とした測定も検討中である。
|
-
[Presentation] 重症熱性血小板減少症候群（SFTS）における凝固能異常.2018
Author(s)
川口剛, 川田千紘, 力武雄幹, 力武真央, 岩尾浩昭, 相澤彩子, 仮屋裕美, 松田基弘, 宮内俊一, 梅北邦彦, 高城一郎, 岡山昭彦
Organizer
第92回日本感染症学会講演会 第66回日本化学療法学会総会合同学会
-
[Presentation] 致死性不整脈を合併した重症熱性血小板減少症候群の一例.2018
Author(s)
岩尾浩昭, 川口剛, 木村賢俊, 川田千紘, 力武真央, 相澤彩子, 仮屋裕美, 松田基弘, 宮内俊一, 梅北邦彦, 高城一郎, 岡山昭彦
Organizer
第1回SFTS研究会・学術集会
-
[Presentation] 重症熱性血小板減少症候群(SFTS) における神経学的異常.2018
Author(s)
川口剛, 木村賢俊, 川田千紘, 力武真央, 岩尾浩昭, 相澤彩子, 仮屋裕美, 松田基弘, 宮内俊一, 梅北邦彦, 高城一郎, 岡山昭彦
Organizer
第1回SFTS研究会・学術集会
-
