2017 Fiscal Year Research-status Report
DNAメチル化酵素の視点から治療関連白血病のマイクロRNAの制御破綻を俯瞰する
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17K16189
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| Research Institution | Nagasaki University |
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Principal Investigator |
糸永 英弘 長崎大学, 病院(医学系), 助教 (70530442)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 治療関連白血病 / DNAメチル化 / マイクロRNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
固形癌や造血器腫瘍に対する抗癌剤または放射線治療後に発症した治療関連白血病について、長崎県において疫学調査を行ったところ1164例の白血病症例のうち約10%が治療関連白血病に分類されることが明らかとなった。
本研究の目的は、治療関連白血病症例においてDNAメチル化酵素が関与するDNAメチル化異常を同定し、治療関連白血病の病態形成におけるエピゲノム異常の意義を明らかにすることである。そのために、治療関連白血病症例およびde novo白血病症例から得られた骨髄血中の白血病幹細胞を含むCD34陽性細胞分画を抽出し、DNAメチル化酵素（DNMT1、DNMT3A、DNMT3B）の遺伝子転写産物量を測定する。また、DNAメチル化アレイにより網羅的にDNAメチル化状態を解析する。そして、治療関連白血病症例とde novo白血病症例を比較し、治療関連白血病症例に特異的な異常を見出す。現在までに疫学調査から得られた治療関連白血病の特徴を有する治療関連白血病3例とde novo白血病12例から解析の同意を得ている。
今後は解析に用いる検体の更なる収集を進め、治療関連白血病症例とde novo白血病例において、DNAメチル化酵素遺伝子転写産物量とDNAメチル化プロファイルを比較・検討する。そして、治療関連白血病の病態形成への関与が示唆されるDNAメチル化異常とDNAメチル化酵素の遺伝子転写産物量の関係を検証する。そして、臨床検体を用いてマイクロRNAの発現解析を行い、DNAメチル化酵素の転写調整に関与するマイクロRNAを明らかにする。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
研究代表者は、本邦の治療関連白血病の臨床的な背景を明らかにするとともに、分子生物学的な解析を行う対象症例の基盤的な臨床情報を得るという初年度の目的を達成するために、長崎県の治療関連白血病（骨髄異形成症候群、急性白血病）の疫学研究を行った。長崎県において血液疾患の診療を行う関連病院（長崎大学病院、日本赤十字社長崎原爆病院、長崎みなとメディカルセンター、国立病院機構長崎医療センター、佐世保市総合医療センター、聖フランシスコ病院、諫早総合病院、県立島原病院、五島中央病院）において、2000年1月から2016年12月までの期間に骨髄異形成症候群と白血病の診断を受けた症例について、患者背景に関わる基本的な内容の臨床情報の収集を行った。臨床情報を収集した症例総数は1164例であり、このうち約10%が治療関連白血病と見込まれている。現在はこれらの症例の臨床的特徴を統計学的に解析するために、治療関連白血病発症前に受けた治療内容や原疾患（抗癌剤治療や放射線治療の対象となった悪性腫瘍）の経過について詳細な臨床情報を得るために、収集作業を進めている。
また、治療関連白血病の白血病幹細胞分画を用いたDNAメチル化酵素の発現解析、網羅的なDNAメチル化解析とマイクロRNA(miRNA)発現解析を行うために、臨床検体収集に関する環境整備を行った。臨床検体を用いた上記の解析を行うために、長崎大学病院の倫理員会に申請を行い、2017年3月31日に承認を得た。初年度において治療関連白血病の症例は3例、コントロールとして用いる予定であるde novo 白血病（抗癌剤治療や放射線治療を受けた病歴を有さない症例）は12例から骨髄血検体を収集し、研究使用についての同意を得た。
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| Strategy for Future Research Activity |
疫学研究に関しては、治療関連白血病症例の疾患情報と、治療関連白血病発症前の治療内容の関係を明らかにするために臨床情報の収集を進めていく。特に、発症前の治療情報として使用した抗癌剤の種類や放射線治療の詳細な内容と、治療関連白血病の呈する染色体異常や既存の予後因子との関係を検証するように統計解析を進めていくことを計画している。この点については、長崎県下の血液内科関連施設においてデータベースを構築するにあたり、臨床情報の収集に関するシステムが整備されており、疫学研究の円滑な展開が期待できる。
現時点では治療関連白血病の検体は3例の集積にとどまっているが、今年度も継続して検体の収集を進めていく。また、白血病幹細胞分画（CD34陽性細胞分画）における網羅的なDNAメチル化パターンの解析については、研究代表者らが実施した先行研究において用いた方法にて検証を行う予定である（Itonaga H, et al. Leukemia 2014.）。DNAメチル化酵素（DNMT）の発現量に関しては、DNMT1/DNMT3A/DNMT3Bの各遺伝子について、定量的PCR法を用いた遺伝子発現量の定量を行うことを計画している。DNAメチル化プロファイルと各DNMT遺伝子発現量について、健常人の造血幹細胞分画（CD34陽性細胞分画）やde novo 白血病症例における白血病幹細胞分画と比較することで治療関連白血病特異的な異常を見出す。この検証により、DNMTがもたらすDNAメチル化異常の治療関連白血病における病的意義が明らかになれば、DNMTの翻訳制御に関わるmiRNAを検証する意義が高まることになる。miRNAの発現解析については、上記の解析で用いた同一の症例の白血病幹細胞分画の検体を用いて検証することを考えている。
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[Journal Article] Genetic abnormalities in myelodysplasia and secondary acute myeloid leukemia: impact on outcome of stem cell transplantation2017
Author(s)
Yoshizato T, Nannya Y, Atsuta Y, Shiozawa Y, Iijima-Yamashita Y, Yoshida K, Shiraishi Y, Suzuki H, Nagata Y, Sato Y, Kakiuchi N, Matsuo K, Onizuka M, Kataoka K, Chiba K, Tanaka H, Ueno H, Nakagawa MM, Przychodzen B, Haferlach C, Kern W, Aoki K, Itonaga H, et al.
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Journal Title
Blood
Volume: 129
Pages: 2347～2358
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] High-dose Chemotherapy with Stem Cell Rescue Provided Durable Remission for Classical Hodgkin Lymphoma-type Post-transplant Lymphoproliferative Disorder after Unrelated Cord Blood Transplantation: A Case Report and Review of the Literature.2017
Author(s)
Itonaga H, Kato T, Fujioka M, Taguchi M, Taniguchi H, Imaizumi Y, Yoshida S, Miyoshi H, Moriuchi Y, Ohshima K, Miyazaki Y.
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Journal Title
Internal Medicine
Volume: 56
Pages: 1873～1877
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Presentation] Chromosomal Analysis of Myelodysplastic Syndromes Among Atomic Bomb Survivors in Nagasaki2017
Author(s)
Miyazaki Y, Horai M, Iwanaga M, Sato S, Matsuo M, Horio K, Jo T, Takasaki Y, Kawaguchi Y, Tsushima H, Yoshida S, Taguchi M, Itonaga H, Swayama Y, Taguchi J, Imaizumi Y, Hata T, Moriuchi Y, Haase D, Yoshiura K.
Organizer
59th American Society of Hematology
Int'l Joint Research
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[Presentation] Allo-HSCT for chronic neutrophilic leukemia and atypical chronic myeloid leukemia2017
Author(s)
Itonaga H, Miyazaki Y, Imai K, Hasegawa Y, Ikeda T, Taji H, Amano I, Ichinohe T, Fukuda T, Atsuta Y, Tanizawa A, Kondo T.
Organizer
第79回 日本血液学会学術集会
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[Presentation] Successful treatment of azacitidine followed by HSCT for MDS with myelofibrosis2017
Author(s)
Fujioka M, Itonaga H, Tukada S, Sakamoto H, Chiwata M, Toriyama E, Kobayashi Y, Sato S, Sawayama Y, Taguchi J, Imaizumi Y, Hata T, Niino D, Miyazaki Y.
Organizer
第79回 日本血液学会学術集会
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[Presentation] Prognostic value of CMV reactivation on posttransplant outcome among the patients with ATL.2017
Author(s)
Sawayama Y, Itonaga H, Fukushima T, Nakano N, Fujiwara H, Fukuda T, Takatsuka Y, Miyamoto T, Eto T, Nakashima Y, Kanda J, Atsuta Y, Utsunomiya A.
Organizer
第79回 日本血液学会学術集会
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[Presentation] Retrospective analysis of TKI combined chemotherapy for elderly patients with Ph+ALL2017
Author(s)
Sakamoto H, Itonaga H, Fujoka M, Tsukada S, Chiwata M, Toriyama E, Kamijo R, Kitanosono H, Nakashima J, Taguchi M, Kato T, Makiyama J, Sato S, Ando K, Sawayama Y, Imaizumi Y, Yoshida S, Hata T, Moriuchi Y, Miyazaki Y.
Organizer
第79回 日本血液学会学術集会
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[Presentation] U2AF2 mutations in myelodysplastic syndrome.2017
Author(s)
oshizato T, Nannya Y, Atsuta Y, Shiozawa Y, Yoshida K, Onizuka M, Kataoka K, Chiba K, Tanaka H, Shiraishi , Sanada M, Itonaga H, Kanda Y, Miyazaki Y, Miyano S, Makishima H, Ogawa S.
Organizer
第79回 日本血液学会学術集会
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