2019 Fiscal Year Annual Research Report
Regulatory mechanisms for microenvironment and metastasis of cancers with glycosphigolipids via extracellular vesicles
| Project/Area Number |
17K19616
|
|---|
| Research Institution | Chubu University |
|---|
Principal Investigator |
古川 鋼一 中部大学, 生命健康科学部, 教授 (80211530)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2017-06-30 – 2020-03-31
|
| Keywords | エクソソーム / ガングリオシド / GD3 / インテグリン / 細胞膜 / EGF受容体 / 糖脂質 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
癌細胞由来の液性因子及びエクソソームによる微小環境の制御機能の解析のため、いくつかの有意義な成果を取得することができた。
1. メラノーマ、グリオーマ、小細胞性肺癌細胞株において、ガングリオシドGD3 を発現しないコントロール細胞と、GD3合成酵素遺伝子cDNA を導入して樹立したトランスフェクタント細胞株を用いて、超遠心法によりエクソソームの調製を行って、その糖脂質関連膜タンパク質分子の発現レベルをimmunoblotting で解析するとともに、親細胞株自身との比較検討を行った。その結果、GD3の発現の有無によらず、エクソソームのレベルに大きな差異は認めなかった。そこで、GD3の有無による、エクソソーム中のインテグリンの含量を比較検討したところ、GD3発現細胞の方が、各々の対応するGD3陰性コントロール細胞に比して、インテグリンが著明に増量していることが示された。このことは、各々のインテグリンのisoformに共通して認められた。一方、元の親細胞株の細胞膜のインテグリンに関しては、インテグリンのバンドの強さに明らかな差を認めなかった。
2. 同様に、癌細胞との関連が指摘されているEGF受容体４種に関して解析を行った結果、親の細胞株の膜における発現がGD3発現細胞で亢進していた。エクソソームにおいて同様に比較検討したところ、やはりGD3陽性細胞で発現が亢進しており、エクソソームだけの現象ではないことが分かった。
3. エクソソーム中の糖脂質組成を、生化学的抽出とTLCによる検出で比較検討したところ、基本的に親株における糖脂質の組成と同様のプロフィールが認められた。現在、質量分析にて詳細な解析を行っている。
4. GD3陽性細胞由来のエクソソームが、培養GD3陰性細胞に与える生物学的作用を検討し、基本的なシグナル分子の活性化を認めており、現在、詳細に検討中である。
|
-
-
-
[Journal Article] Novel molecular mechanisms for roles of gangliosides in the nervous system elucidated by genetic engineering2020
Author(s)
Furukawa, K., Ohmi, Y., Yesmin, F., Tajima, O., Kondo, Y., Pu Zhang, P., Hashimoto, N., Ohkawa, Y., Bhuiyan, R.H., Furukawa, K
-
Journal Title
Int. J. Mol. Sci.
Volume: 21
Pages: E1906
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
-
-
-
[Journal Article] Cholera toxin B induces interleukin-1β production from resident peritoneal macrophages through the pyrin inflammasome as well as the NLRP3 inflammasome2019
Author(s)
Orimo T, Sasaki I, Hemmi H, Ozasa T, Fukuda-Ohta Y, Ohta T, Morinaka M, Kitauchi M, Yamaguchi T, Sato Y, Tanaka T, Hoshino K, Katayama KI, Fukuda S, Miyake K, Yamamoto M, Satoh T, Furukawa K, Kuroda E, Ishii KJ, Takeda K, Kaisho T
-
Journal Title
Int. Immunol.
Volume: 18
Pages: 657-668
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] Deficiency of GD3 Synthase in Mice Resulting in the Attenuation of Bone Loss with Aging2019
Author(s)
Yo S, Hamamura K, Mishima Y, Hamajima K, Mori H, Furukawa K, Kondo H, Tanaka K, Sato T, Miyazawa K, Goto S, Togari A
-
Journal Title
Int. J. Mol. Sci.
Volume: 10
Pages: 2825
DOI
Peer Reviewed
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
