2006 Fiscal Year Annual Research Report
ウイルスケモカインホモログを標的としたヒトサイトメガロウイルス感染モデルの開発
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18390293
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| Research Institution | Tokai University |
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Principal Investigator |
野田 敏司 東海大学, 医学部, 講師 (10297260)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐藤 正宏 鹿児島大学, フロンティアサイエンス研究推進センター, 教授 (30287099)
田中 和生 東海大学, 医学部, 助教授 (50236569)
竹腰 正隆 東海大学, 医学部, 講師 (80221373)
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| Keywords | マウスサイトメガロウイルス / ウイルスケモカインホモログ / MCK-2 / Late myeloid progenitor / CODEHOP |
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| Research Abstract |
目的:MCMV(murine cytomegalovirus)がコードするケモカインホモログMCK-2(murine chemokine-2)は、LMP(late myeloid progenitor)を感染・発現局所に動員する。LMPはCD31^+Mac-1^+Gr-1^<int>のフェノタイプを提示する。本後期未熟骨髄紳胞は、MCMVの格好の標的細胞と推測され、感染個体の病原性の発揮に関与していると考えられている(Noda et al.,Blood,2006)。本研究では、HCMV-IE1プロモーター制御下にGFP(green fluorescence protein)をマーカーに発現するMCMV-mutants(RM4503;MCK-positive virus, RM4511;MCK-negative virus)を用い、(1)LMPがMCMVの感染標的細胞の一つであるのか、(2)MCK動員性LMPの個体病原性発揮への貢献、ならびに(3)Marmoset Herpesvirusesの同定方法(CODEHOP:consensus-degenerate hybrid oligonucleotide primers)、について検討を行った。結果:(1)マウスの足裏にRM4503あるいはRM4511を接種2日目に当該肉趾を切除、これをコラゲナーゼ処理にてsingle cell化後、密度勾配遠心法を用いて白血球分画を分離した。同分離細胞を用いて、FACSによるLMPサブセットのウイルス感染率(GFP-positive cells)を検定した。MCK-positive virusにおける感染率が、MCK-negative virusのそれの10倍を提示した。MCK発現によって、感染局所に高率に動員されてくるLMPが、ウイルスの標的細胞群の-サブセットであることが示唆された。(2)上述の結果は、LMPがウイルスの格好のキャリアーであること、かつ、個体のウイルス感染病原性の発揮に、何らかの役割を担っているものと考えられた。LMPは放射線に感受性が高く、同処理によって著明に減少する(Noda and Mocarski, in preparation)。そこで、ウイルス(RM4503あるいはRM4511)を肉趾感染後、ガンマ線処理を施したマウスを用いて、ウイルス標的臓器(脾臓:急性感染期、唾液腺:持続感染期)におけるウイルス価を検定し、MCK動員性LMPについて検討を加えた。結果、いずれの変異ウイルスのマウス標的細胞感染価間でも相違が認められなかった(Smith, Noda, and Mocarski, unpublished data)。放射線処理はLMPに高感受性とはいえ、他の造血系の細胞にも影響があることが推測されるため、細胞移入実験による検討が必要と考えられる。(3)CODEHOPのデザイン設定を完了し、三種のプライマーセットの有効な検出を確認した。
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[Journal Article] Cytomegalovirus MCK-2 controls mobilization and recruitment of myeloid progenitor cells to facilitate dissemination2006
Author(s)
Noda, S, Aguirre, SA, BitMansour, A., Brown, JM, Sparer, TE, Huang, J, Mocarski, ES.
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Journal Title
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[Journal Article] Construction of mouse 129/Ola BAC library for targeting experiments using E14 embryonic stem cells.2006
Author(s)
Ohtsuka, M, Ishi, K, Kikuti, YY, Warita, T, Suzuki, D, Sato, M, Kimura, M, Inoko, H.
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Journal Title
Genes and genetic Systems 81
Pages: 143-146
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[Journal Article] Treatment of Natto, a fermented soybean preparation, to prevent excessive plasma vitamin K concentrations in patients taking Warfarin.2006
Author(s)
Homma, K., Wakana, N., Suzuki, Y., Nukui, M., Daimatsu, T., Tanaka, E., Tanaka, K., Koga, Y., Nakajima, Y., Nakazawa, H.
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Journal Title
J. Nutr. Sci. Vitamiol. 52
Pages: 297-301
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[Journal Article] Production of Fab fragment corresponding to surface protein antigen of Streptococcus mutans serotype c-derived peptide by Escherichia coli and cultured tobacco cells.2006
Author(s)
Yano, A., Takekoshi, M., Morita, E., Imai, S., Nisizawa, T., Hanada, N.
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Journal Title
J. Biosci. Bicengineer. 101
Pages: 251-256
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[Book] Cytomegaloviruses : Molecular Biology and Immunology : Myeloid cell recruitment and function in pathogenesis and latency.2006
Author(s)
Mocarski, E.S., G.Hahn, K.L.White, J.Xu, B.Slobedman, L.Hertel, S.A.Aguirre, S.Noda.
Total Pages
465-481
Publisher
Caister Academic Press, Hethersett, Norfolk, United Kingdom
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