2007 Fiscal Year Annual Research Report
コラーゲン合成制御によるスキルス胃癌間質の線維化、硬化抑制に関する基礎的研究
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18591482
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| Research Institution | Kitasato University |
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Principal Investigator |
菊池 史郎 Kitasato University, 医学部, 准教授 (30161417)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
永田 和宏 京都大学, 再生医科学研究所, 教授 (50127114)
安達 栄治郎 北里大学, 医療系研究科, 教授 (30110430)
二渡 信江 北里大学, 医学部, 助教 (40306600)
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| Keywords | 胃癌 / スキルス / コラーゲン / 線維芽細胞 / HSP47 / 間質制御 |
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| Research Abstract |
本研究では、スキルス胃癌組織の主要構成成分である癌細胞、線維芽細胞、コラーゲンの相互作用を再現した実験モデルを開発し、コラーゲン産生の抑制が新たな治療戦略となりうるかについて検討することを目的としている。
(1)実験モデルの開発:閉鎖式循環培養装置(BKR-05,ABLE Biott)によるコラーゲン高密度培養組織は、線維芽細胞と共培養することにより、ヌードマウス皮下に癌細胞を移植させることが可能であった。しかし、培養装置内に再構成される組織には還流の不安定性から来るばらつきが存在し、ダクロン人工血管の転用により、安定的に組織を回収することが可能となった。
(2)レトロウイルスによるsiRNA導入:コラーゲン産生抑制の標的分子としてheat shoch protein(HSP)47を選択し、持続的なsiRNAによるHSP47の抑制効果を得るために、siRNA配列を有するプラスミドベクターをレトロウイルスに導入した。このウイルスを細胞株に感染させた後3継代を経た細胞は、感染前の細胞株と比較し相対的にmRNAの発現量が8%にまで抑制されていた。しかし、ウイルスの標的細胞への導入効率が非常に悪く、プラスミド導入細胞のselection後、回収可能となる細胞がわずかであり、回収細胞の良好な境内が不可能であった。ウイルス導入に祭し、fibrone ctincoating dishを使用することにより、導入効率の改善が、認められるようになり、移植実験に使用可能な細胞数を回収可能となった。
今後、作成したsiRNA導入細胞を実験モデルに導入することにより、細胞のコラーゲン産生に対する、癌の発育増殖能への影響を検討していく方針である。
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Research Products
(1 results)
