2020 Fiscal Year Annual Research Report
上皮組織損傷をスイッチとして稼働する神経依存性の新たな創傷治癒メカニズム
| Project/Area Number |
18H02524
|
|---|
| Research Institution | Nagoya University |
|---|
Principal Investigator |
桐生 寿美子 (瀬尾寿美子) 名古屋大学, 医学系研究科, 准教授 (70311529)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2022-03-31
|
| Keywords | 組織修復 / 創傷治癒 / 免疫応答 / 神経再生 / 神経変性 / ペプチド / プロテアーゼ |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では組織損傷後の神経依存性創傷治癒制御機構を明らかにすることを目的とし、神経損傷に応答し発現誘導されるユニークな特徴を有する膜一回貫通型メタロプロテアーゼDINE (Damage induced neuronal endopeptidase) に焦点を当て研究を進めた。組織損傷を受けると同時に損傷される神経でDINEは発現誘導され軸索末端まで輸送され損傷神経周囲微小環境内の細胞動態を制御することがこれまで明らかになっている。このことはDINEが自身のプロテアーゼ活性を介して基質ペプチドをメディエーターとして損傷環境内の細胞動態に影響を及ぼす可能性を示唆する。損傷神経周囲では免疫応答の活性化が顕著であることから、損傷神経末端に局在するDINEの標的細胞として好中球やマクロファージなどの代表的な免疫細胞を考えこれまで共培養システムを用いて解析を進めてきた。しかし損傷微小環境は複雑な多くの細胞集団からなりこれら以外の標的細胞が多数存在する可能性を無視することはできない。そこで本年度は損傷神経周囲の微小環境内の細胞を個別に探索・解析するためシングルセルRNA seqを行うことにした。これまで恒常的にDINEがノックアウトされたマウスを実験に使用してきたが、恒常的DINE欠損により損傷前にすでに生体システム内の免疫系などに影響を及ぼしている可能性が十分考えられる。このためDINE floxマウスと損傷神経細胞特異的Creマウスとを交配し損傷神経細胞特異的にDINEをノックアウトすることが可能なマウスを作製し実験に使用した。コントロールマウスと損傷特異的DINE CKOマウスの損傷神経軸索末端から有核細胞をソーティングしサンプル調整後シングルセルRNA seqを実施し、損傷神経周囲の微小環境内細胞の個別解析を試みた。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
マウス準備やシングルRNA seqのためのサンプル調整の条件検討に多くの時間を費やしたため実験計画に遅れが生じている。
|
| Strategy for Future Research Activity |
昨年度に引き続き、DINEによる神経依存性創傷治癒環境制御を解析する。遅れが認められるシングルセルRNA seqのデータの解析を積極的に進める。データ解析により方向性が得られたら、in vivoでの組織学的および生化学的検討を進めるとともに、昨年までにある程度のシステムを確立している共培養系を用いて実験を行い基質同定につながる細胞動態の変化を明らかにしたい。最終年度であることを考慮し、これまでのデータをまとめ不足分など適宜追加しながら論文投稿へ向けての準備を進める予定である。
|
-
[Journal Article] Zonisamide ameliorates neuropathic pain partly by suppressing microglial activation in the spinal cord in a mouse model2020
Author(s)
Hiroyuki Koshimizu, Bisei Ohkawara,Hiroaki Nakashima, Kyotaro Ota, Shunsuke Kanbara, Taro Inoue, Hiroyuki Tomita, Akira Sayo, Sumiko Kiryu-Seo, Hiroyuki Konishi, Mikako Ito, Akio Masuda, Naoki Ishiguro, Shiro Imagama, Hiroshi Kiyama, Kinji Ohno
-
Journal Title
Life Sci
Volume: 263
Pages: 118577
DOI
Peer Reviewed
-
[Journal Article] TC10, a Rho family GTPase, is required for efficient axon regeneration in a neuron-autonomous manner2020
Author(s)
Shingo Koinuma, Ryota Negishi, Riko Nomura, Kazuki Sato, Takuya Kojima, Eri Segi-Nishida, ;Ryo Goitsuka, Yoichiro Iwakura, Naoyuki Wada, Yoshiki Koriyama, Sumiko Kiryu-Seo, Hiroshi Kiyama, Takeshi Nakamura
-
Journal Title
J Neurochem
Volume: -
Pages: -
DOI
Peer Reviewed
-
-
-
-
