2020 Fiscal Year Annual Research Report
抗フラビウイルス薬の創製を目指した中和モノクローナル抗体認識の立体構造基盤
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18H02855
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| Research Institution | High Energy Accelerator Research Organization |
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Principal Investigator |
加藤 龍一 大学共同利用機関法人高エネルギー加速器研究機構, 物質構造科学研究所, 准教授 (50240833)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小澤 龍彦 富山大学, 学術研究部医学系, 准教授 (10432105)
正木 秀幸 近畿大学, 生物理工学部, 准教授 (90247982)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | ウエストナイルウイルス / フラビウイルス / 中和抗体 / Ｘ線結晶構造解析 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ウエストナイルウイルス（WNV）は、時に致死性の脳炎・髄膜炎を惹き起こすフラビウイルス科の蚊媒介性ヒト感染性ウイルスである。世界の広い地域に分布し我が国への感染拡大の危険性が指摘されているが、実用的な治療薬やワクチンは未だ無い。研究分担者らによって見出された WNV に働く中和抗体は、同じフラビウイルス科の日本脳炎ウイルス（JEV）とも交差反応を示すという興味深い性質を持つ。我々はその分子機構を明らかにするために以下の研究を行った。まず、WNV 中和抗体を Fab 化した発現コンストラクト、および WNV のエンベロープタンパク質の発現コンストラクトを作成し、それらの発現精製を行い、結晶構造解析に十分な純度と量のサンプルを得た。それらを用いて結晶化を行い、Ｘ線結晶構造解析により複合体の立体構造を 2.6 Å分解能で決定した。２種類の抗原に活性を示すモノクローナル抗体の単離自体ユニークであり、それと WNV のエンベロープタンパク質複合体の立体構造解析は当然唯一無二である。明らかにした立体構造および変異体を用いた結合測定実験結果から、この中和抗体は JEV と WNV に保存されているArg388を認識し、また抗体Ｌ鎖ＣＤＲの特異性に許容範囲がある、という認識機構を明らかにすることができた。この知見は、フラビウイルスに共通の抗体医薬および合成低分子抗ウイルス薬の創薬を検討する上で重要な知見を与えると考えられる。
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| Research Progress Status |
令和2年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
令和2年度が最終年度であるため、記入しない。
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[Journal Article] Production of a rabbit monoclonal antibody for highly sensitive detection of citrus mosaic virus and related viruses2020
Author(s)
Miyoshi S, Tokunaga S, Ozawa T, Takeda H, Aono M, Miyoshi T, Kishi H, Muraguchi A, Shimizu S I, Nozawa A, Sawasaki T.
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Journal Title
PLoS One
Volume: 15
Pages: e0229196
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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