2021 Fiscal Year Research-status Report
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18K05490
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| Research Institution | University of Miyazaki |
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Principal Investigator |
西山 和夫 宮崎大学, 農学部, 准教授 (40164610)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
榊原 陽一 宮崎大学, 農学部, 教授 (90295197)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | レドックス / ニトロオレイン酸 / がん細胞選択的増殖抑制作用 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ニトロオレイン酸（NO2-OA）は親電子性物質の一種である。親電子性物質はタンパク質チオール基（SH基）との反応を介してがん細胞の増殖を抑制するという報告がされている。これまでNO2-OAが濃度依存的・がん細胞選択的に細胞増殖抑制と細胞死の誘導を引き起こすこと、がん細胞内は正常細胞と比較してグルタチオン（GSH）濃度が低いことを明らかにしてきた。今年度は、NO2-OAのヒト膀胱がん細胞増殖抑制作用および細胞死のメカニズム解明を目的として研究を行った。ヒト膀胱がん由来のT-24細胞と正常ヒト尿管上皮由来のSV-HUC-1細胞を用い、NO2-OAによる細胞死がアポトーシスによるものかどうかを確かめるためにアポトーシス阻害剤（Z-VAD-FMK）を用いた細胞毒性試験およびフローサイトメーターによるアポトーシス解析を行った。T-24細胞の生細胞率は、NO2-OA処理により有意に低下し、Z-VAD-FMK処理により回復した。また、フローサイトメーターによるアポトーシス解析では、NO2-OA処理によりT-24細胞でアポトーシスが検出された。以上の結果より、NO2-OAによるT-24の細胞死がアポトーシスにより引き起こされることが示唆された。NO2-OAによるアポトーシス誘導機構として、転写因子NF-kBの阻害を介したアポトーシス阻害タンパク質Survivinの発現抑制が考えられることから、今後、NF-kBの核内移行やSurvivinの遺伝子とタンパク質発現について検討する予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
がん細胞選択的増殖抑制作用とアポトーシス誘導作用のメカニズムの解明ができていない。
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| Strategy for Future Research Activity |
ヒト膀胱がん細胞株であるT-24細胞を用いて、下記の項目について検討する。
（1）ニトロオレイン酸（NO2-OA）によるアポトーシス阻害タンパク質Survivinの発現抑制。（2）Survivinの遺伝子発現を制御している転写因子であるNF-kBの核内移行へのNO2-OAの影響。（3）アポトーシス促進タンパク質Caspaseの発現と活性化へのNO2-OAの影響。（4）NF-kB経路に関与するタンパク質発現へのNO2-OA の影響。（5）細胞周期関連タンパク質Cyclinの発現へのNO2-OA の影響。（6）フローサイトメトリーによる細胞周期解析。（7）膜脂質の過酸化へのNO2-OA の影響。さらに正常ヒト尿管上皮細胞であるSV-HUC-1細胞を用いて上記の項目について検討する。
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| Causes of Carryover |
がん細胞選択的増殖抑制作用とアポトーシス誘導作用のメカニズムに関する検討を行うことができなかった。残額は試薬類、細胞培養用培地・器具、抗体等の購入に使用する予定である。
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