2019 Fiscal Year Research-status Report
悪性黒色腫における免疫編集の役割とその治療標的化の研究
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18K08276
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| Research Institution | Saitama Medical University |
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Principal Investigator |
村上 孝 埼玉医科大学, 医学部, 教授 (00326852)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
堀内 大 埼玉医科大学, 医学部, 講師 (30608906)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | メラノーマ / 腫瘍免疫 / 細胞死 / 細菌 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
悪性黒色腫（メラノーマ）は免疫原性を持つ一方、その進展過程で特異な免疫逃避能とともに様々な治療に対する抵抗性を獲得する。特に腫瘍排除に至らなかった免疫活性化は、免疫編集の結果、腫瘍に免疫逃避能を付与し（抗腫瘍免疫反応の「負の側面」）、腫瘍内の間質形成や浸潤・転移を促進することが考えられる。当該年度では、メラノーマ自然発症モデルとなるBRaf(CA)Pten(loxP)Tyr::CreERT2マウスを用いた。当該マウスの耳介局所に腫瘍誘導のため、タモキシフェンを塗布したところ、４週間ほどで塗布部位の色素斑形成の後、造腫瘍性を獲得した。さらに腫瘍形成部位の病理組織学的検討を行なったところ、異型性を伴う大型メラノサイトの増殖と単核球細胞の浸潤が観察された。また腫瘍内浸潤リンパ球のFACS解析では、顎下リンパ節と比較してメラノーマ抗原gp100（テトラマー）に反応するCD8陽性T細胞の割合が増加していた。これらの結果は、当該マウスモデルはメラノーマ発生の初期過程から造腫瘍性に至る免疫編集と腫瘍内免疫・微小環境を解析する有用な系となりうると考えられた。一方、進展したメラノーマでは腫瘍内環境が嫌気性に偏移することから、嫌気性集積を特徴とする（蛍光標識）細菌ベクターによる嫌気性腫瘍微小環境修飾について検討を開始した。B16F10メラノーマ細胞に対する細菌ベクターの感染条件をin vitroで検討し、感染B16F10細胞に特徴的な細胞死が誘導されることを見出した。現在、この新規細菌ベクターによるによるメラノーマ腫瘍内環境変化の特徴について解析を進めている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
メラノーマ自然発症モデルマウスを自家繁殖する一方、３遺伝子型混合型個体の安定した産出に苦慮している（主に親マウスに夜新生仔マウスの食殺）。当該年度では造腫瘍性に伴う腫瘍内微小環境の嫌気性条件に注目し、新たに細菌を用いたベクターシステムによる腫瘍変化を検討した。その結果、細菌ベクターの腫瘍細胞への高い感染条件を見出すことに成功し、併せて感染腫瘍細胞には特徴的な細胞死が誘導されることが判明した。この結果は本研究が目指す宿主免疫応答と免疫逃避の分岐点を見極める新しいツールになるとともに、新規腫瘍治療の開発において重要な知見であると考えられる。
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| Strategy for Future Research Activity |
新規に導入した細菌ベクター感染とメラノーマ細胞の特徴的な細胞死を見出した。腫瘍細胞における特徴的な遺伝子発現やサイトカイン産生の変化など、in vitroからin vivoにわたる多角的な解析を実施し、細菌ベクターによる腫瘍内微小環境修飾と免疫編集における役割について検討を進める。特に、この細胞死に対する宿主免疫細胞の応答様式を明らかにするため、ベクター感染腫瘍細胞と宿主免疫細胞を用いた各種in vitro免疫アッセイ、マウス移植腫瘍モデルを利用したin vivo実験を優先したい。
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| Causes of Carryover |
メラノーマ自然発症モデルマウスの繁殖に苦慮していたため、当該モデルを用いた免疫応答の検討が計画通りに進まず、関連試薬・消耗品などの支出が抑えられていた。次年度はベクター細菌感染が誘導する細胞死と、この細胞死によって誘導される免疫反応の解析に用いる試薬類及びin vivo実験に供する実験動物費用、成果発表費用などで、全額執行したい。
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Research Products
(11 results)
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[Journal Article] An Efficient Photodynamic Therapy Treatment for Human Pancreatic Adenocarcinoma.2020
Author(s)
Quilbe A, Morales O, Baydoun M, Kumar A, Mustapha R, Murakami T, Leroux B, de Schutter C, Thecua E, Ziane L, Colombeau L, Frochot C, Mordon S, Delhem N.
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Journal Title
J Clin Med.
Volume: 9(1)
Pages: E192 (1-13)
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] An In Vivo Mouse Model of Pelvic Recurrence of Human Colorectal Cancer.2019
Author(s)
Yamamoto M, Masubuchi S, Taniguchi K, Tominaga T, Inomata Y, Miyamoto A, Ishizuka T-A, Murakami T, Osumi W, Hamamoto H, Tanaka K, Okuda J, Uchiyama K.
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Journal Title
Sci Rep.
Volume: 9(1)
Pages: 19630
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Establishment and characterization of a novel neuroendocrine carcinoma cell line derived from a human ascending colon tumor.2019
Author(s)
Shinji S, Sasaki N, Yamada T, Koizumi M, Matsuda A, Ohta R, Yokoyama Y, Takahashi G, Hotta M, Hara K, Takeda K, Ueda K, Kuriyama S, Ishiwata T, Murakami T, Ueda Y, Kanazawa Y, Yoshida H.
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Journal Title
Cancer Sci.
Volume: 110(12)
Pages: 3708-3717
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Critical role of the MCAM-ETV4 axis triggered by extracellular S100A8/A9 in breast cancer aggressiveness.2019
Author(s)
Chen Y, Sumardika IW, Tomonobu N, Kinoshita R, Inoue Y, Iioka H, Mitsui Y, Saito K, Ruma IMW, Sato H, Yamauchi A, Murata H, Yamamoto KI, Tomida S, Shien K, Yamamoto H, Soh J, Futami J, Kubo M, Putranto EW, Murakami T, Liu M, Hibino T, Nishibori M, Kondo E, Toyooka S, Sakaguchi M.
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Journal Title
Neoplasia.
Volume: 21(7)
Pages: 627-640
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Presentation] Inhibition of Hepatocyte Growth Factor (HGF) Signalling Pathway in Combination With Chemotherapy Reduces Tumour Burden in an Orthotopic Model of Advanced Pancreatic Cancer.2019
Author(s)
Xu Z, Pang T, Pothula S, Mekapogu A, Perera C, Murakami T, Goldstein D, Pirola R, Wilson J, Apte M.
Organizer
The 50th Annual Meeting of American Pancreatic Association. Grand Wailea, Maui, Hawaii, USA, Nov 6-9, 2019.
Int'l Joint Research
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[Presentation] Inhibition of Hepatocyte Growth Factor (HGF) Signalling Pathway in Combination With Chemotherapy Reduces Tumour Burden in an Orthotopic Model of Advanced Pancreatic Cancer.2019
Author(s)
Xu Z, Pang T, Pothula S, Mekapogu A, Perera C, Murakami T, Goldstein D, Pirola R, Wilson J, Apte M.
Organizer
Australian Gastroenterology Week 2019 (the Gastroenterological Society of Australia) Adelaide Convention Centre, Adelaide, SA, Australia. Sept 8-10, 2019.
Int'l Joint Research
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