2018 Fiscal Year Research-status Report
HTLV-1キャリアのATL発症予防対策に向けた潜伏感染のメカニズム解明
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18K08378
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| Research Institution | National Institute of Infectious Diseases |
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Principal Investigator |
浜口 功 国立感染症研究所, 血液・安全性研究部, 部長 (90348780)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | HTLV-1 / ヒト化マウス / in situ hybridization |
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| Outline of Annual Research Achievements |
HTLV-1感染における生体内でのリザーバー組織や感染細胞を同定する目的で、ヒト化マウスにHTLV-1を感染させることでHTLV-1キャリアマウスモデルの確立を試みた。この度ヒト化マウスにHTLV-1感染細胞株を経口投与することで長期間の低ウイルス量が維持されることを見出し、未症候キャリアモデル確立の可能性が示された。
また、ウイルスリザーバー等の同定のための研究手法の改善に取り組んだ。HTLV-1は生体内ではウイルス抗原の発現量が極めて低いレベルで維持されており、組織における感染細胞の正確な局在や分布を検討することが困難であった。そこで、次世代のin situ hybridization手法を用いて生体内HTLV-1 RNA検出法の確立を試みた。HTLV-1ウイルスゲノムからは少なくとも6種類の転写産物がplus-strand mRNAとして機能することが明らかになっているが、これらのRNA種の共通配列にプローブを作成することで、全てのmRNAを網羅的に検出可能な系を開発した。共通配列を検出することで対象となるmRNAコピー数が増加し、検出感度を飛躍的に高めると考えられた。
本検出法を用いてHTLV-1感染ヒト化マウスにおける各組織におけるHTLV-1発現細胞を解析したところ、リンパ系組織（脾臓、胸腺、腸管膜リンパ節）において顕著なウイルスRNAのシグナルが検出され、これらの臓器においてHTLV-1は活発に発現していることが明らかになった。一方、腎臓、心臓、胃や小腸等の臓器ではほとんどウイルスRNAは検出されなかったが、肺や肝臓の一部ではリンパ濾胞状に集簇したHTLV-1発現細胞が確認された。今後これらのHTLV-1発現細胞についてウイルス学的な意義を検討する予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
HTLV-1感染細胞株の投与経路を検討した結果、ヒト化マウスへ経口投与することで、腹腔内投与と比較して長期間の低ウイルス量が維持されることを見出した。HTLV-1経口感染モデルは未症候キャリアのモデルとなる可能性が示唆され、さらに感染ルートの解明やウイルスリザーバー等の同定に有用なモデルであると期待された。また、新規in situ hybridization法の開発に成功し、生体組織内でのHTLV-1発現細胞の可視化が可能となった。これらの成果は次年度以降の研究の進展に大きく寄与するものと考えられる。
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| Strategy for Future Research Activity |
生体内でのHTLV-1感染細胞の動態、クローナリティの変化やクローン選択、ウイルスリザーバーの出現等には、宿主の免疫機構と感染細胞の相互作用が大きな影響を与える可能性が指摘されている。より実際の感染者の生体内状態を再現するHTLV-1キャリアモデルの確立においては、宿主免疫応答の誘導が不可欠であり、これまでのヒト化マウスモデルの改善が必要である。そこで、HLA遺伝子を導入した免疫不全マウス (NOG-HLA-A2 Tg) に対してHLA-Aアリルが一致する造血幹細胞を移植することで、HTLV-1特異的免疫応答の誘導を再現した新規ヒト化マウスモデルの確立を目指す。
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| Causes of Carryover |
年度末納品等にかかる支払いが平成31年4月1日以降となったため。当該支出分については次年度の実支出額に計上予定であるが、平成30年度分についてはほぼ使用済みである。
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[Journal Article] Value assignment of the reference material for HTLV-1 quantitative PCR in Japan2018
Author(s)
Kuramitsu M, Okuma K, Nakshima M, Sato T, Umeki K, Sasaki D, Hasegawa H, Kubota R, Sobata R, Matsumoto C, Kaneko N, Sasada K, Tezuka K, Uchimaru K, Iwanaga M, Sagara Y, Yamano Y, Okayama A, Miura K, Satake M, Saito S, Watanabe T, Hamaguchi I
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Journal Title
Microbiol. Immunol.
Volume: 62
Pages: 673-676
DOI
Peer Reviewed
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