2018 Fiscal Year Research-status Report
メタロβ-ラクタマーゼを標的とした細菌感染症治療補助剤の開発研究
Project/Area Number |
18K08430
|
Research Institution | Nagoya University |
Principal Investigator |
和知野 純一 名古屋大学, 医学系研究科, 講師 (00535651)
|
Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
|
Keywords | メタロ-β-ラクタマーゼ / 阻害剤 / カルバペネム耐性 |
Outline of Annual Research Achievements |
今年度は、メタロ-β-ラクタマーゼ6種類(IMP-1、NDM-1、VIM-2、SFH-1、SMB-1、L1)を対象に、阻害剤8種類の阻害効果を検討した。簡易的にIC50値を測定したところ、いずれの阻害剤もサブクラスB1 メタロ-β-ラクタマーゼ(IMP-1、NDM-1、VIM-2)に阻害効果を示したものの、他のB2やB3 メタロ-β-ラクタマーゼには阻害効果を示さなかった。また、TLA-3、CMY-2、OXA-48といったセリン型β-ラクタマーゼに対しても阻害効果を示さなかった。したがって、作製した一連の阻害剤群はサブクラスB1 メタロ-β-ラクタマーゼ特異的な阻害剤であると考えられた。IMP-1に対するKi値は0.22-34.1 uM、NDM-1に対するKi値は0.18-34.1 uM、VIM-2に対するKi値は0.02-20.8 uMであった。これらの阻害剤を添加した場合のメタロ-β-ラクタマーゼ産生大腸菌に対する最小発育阻止濃度値(MIC値)の変動は、概ねKi値の変動で裏付けられるものであったが、一部乖離が見られたものもあった。それは、化合物の構造改変によりIMP-1酵素に対する阻害親和性が失われたにも関わらず、IMP-1産生菌に対する阻害効果が保たれた現象を指す。乖離の原因を明らかにするため、LC-MS/MSを用い、菌体内に取り込まれた阻害剤の定量を行った。その結果、阻害剤の種類によって、菌体内に取り込まれる量に差が生じることがわかった。MIC値の変動は、対象とした阻害剤の酵素学的な阻害効果と菌体への流入量という2つのファクターに影響を受ける。したがって、今後、阻害剤を改変する際には、両者のファクターを加味する必要があるものと考えれらた。
|
Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
平成30年度は、作製した各種阻害剤を用い、メタロ-β-ラクタマーゼに対する酵素学的阻害効果とメタロ-β-ラクタマーゼ産生菌に対する生物学的阻害効果を検証することを目標とした。年度内に予定していた実験の全てを終了することができた。
|
Strategy for Future Research Activity |
平成31年度は、X線結晶構造解析の技術を用い、作製した各種阻害剤とメタロ-β-ラクタマーゼの結合様式を原子レベルで明らかにする予定である。
|
Research Products
(3 results)