2018 Fiscal Year Research-status Report
骨肉腫幹細胞モデルにおけるmiR-34aの役割と治療ターゲットの可能性の解析
| Project/Area Number |
18K09058
|
|---|
| Research Institution | Kanazawa University |
|---|
Principal Investigator |
武内 章彦 金沢大学, 附属病院, 助教 (70512218)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山本 靖彦 金沢大学, 医学系, 教授 (20313637)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
|
| Keywords | 骨肉腫 / がん幹細胞 / 糖化蛋白受容体 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
RAGE過剰発現ヒト骨肉種細胞株（HOS-RAGE細胞株）と対称のmock導入ヒト骨肉種細胞株（HOS-mock細胞株）において、平成23-25年度に若手B研究によりHOS-RAGE細胞株では、Genechipによる発現遺伝子解析で有意に変化する遺伝子（主に細胞周期に関わるもの）を複数見出し、平成27-29年度に基盤C研究によりRAGE により NANOG, SOX2 といった幹細胞マーカーの発現が亢進しがん遺伝子である MYC の発現が亢進すること、さらに miRNA の網羅的解析によって miR-34aの発現が有意に低下していることを見出した。そこで、RAGEによってmiR-34aの発現が抑制され、その結果、SOX2、NANOG、MYCの発現が亢進し、がん幹細胞様の性質を獲得したと推察し、平成30年度はmiR-34aを発現させることにより幹細胞様の性質が失われるかを解析した。
１）miR-34aのmiRCURY LNA（Locked Nucleic Acid）microRNA Mimic（合成microRNA）の処理によってHOS-RAGE細胞株のmiR-34aの発現が非投与（コントロール）に対して優位に亢進することをrealtime PCRで確認した。
２）Spheroidの形成能が、コントロールに対して、HOS-RAGE+miR-34aで有意に低下した。
３）がん遺伝子であるc-MYCの発現が、HOS-RAGE+miR-34aはコントロールよりも有意に低下した。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
予定通り、平成30年度はRAGE強制発現骨肉腫細胞株（HOS-RAGE）にmiR-34aのmiRCURY LNA（Locked Nucleic Acid）microRNA Mimic（合成microRNA）を処理することで、幹細胞様の性質が失われることを確認した。RAGEによってがん幹細胞様の性質を示す骨肉腫細胞株でmiR-34aの発現が抑制されており、miR-34a の発現レベルを戻す操作によって、そのがん幹細胞様の性質が失われるという新たな知見がえられつつあると考える。よって、おおむね順調に進展していると判断した。
|
| Strategy for Future Research Activity |
平成31年度は、化学療法抵抗性（WST assay）、CD133、CD24、SOX2、NANOGの遺伝子発現解析（RT-PCR）にて解析する。手術検体における miR-34a の発現を in-situ hybridization で解析し、臨床経過との関連と RAGE と負の相関を示すかを解析する。また、HOS-RAGE株を超免疫不全マウス（NOD.Cg-Prkdc scid Il2 tm1Wji/SzJ）に移植し腫瘍形成・転移能を評価する。
|
Research Products
(24 results)
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
-
[Presentation] Long-term clinical outcomes of 105 patients with diffuse-type tenosynovial giant cell tumor: The East Asia Musculo-skeletal Oncology Group (EAMOG) study2018
Author(s)
Takeuchi A, Niu X, Chen WM, Nakamura T, Nathan SS, Ueda T, Iwata S, Kawai A, Kang YK, Asavamongkolkul A, Wang EHM, Singh VA, Shirai T, Tsuchiya H
Organizer
第91回日本整形外科学会学術集会
-
-
[Presentation] びまん型腱滑膜巨細胞腫の長期成績：東アジア骨軟部腫瘍研究グループ多施設共同研究2018
Author(s)
武内章彦, 山本憲男, Niu X, Chen WM, 中村知樹, Nathan SS, 上田孝文, 岩田慎太郎, 川井 章, Kang YK, Asavamongkolkul A, 白井寿治, 土屋弘行
Organizer
第51回日本整形外科学会 骨・軟部腫瘍学術集会
-
-
-
[Presentation] Long-term clinical outcomes of 105 patients with diffuse-type tenosynovial giant cell tumor: The East Asia Musculo-skeletal Oncology Group (EAMOG) study2018
Author(s)
Takeuchi A, Niu X, Chen WM, Nakamura T, Nathan SS, Ueda T, Iwata S, Kawai A, Kang YK, Asavamongkolkul A, Wang EHM, Singh VA, Shirai T, Tsuchiya H
Organizer
12th Asia Pacific Musculoskeletal Tumor Society（APMSTS）meeting
Int'l Joint Research
-
-
