2018 Fiscal Year Research-status Report
A new method for diagnosis of oral dryness using salivary biomarker
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18K09669
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| Research Institution | The Nippon Dental University |
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Principal Investigator |
水橋 史 (高橋史) 日本歯科大学, 新潟生命歯学部, 准教授 (60386266)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
梨田 智子 日本歯科大学, 新潟生命歯学部, 非常勤講師 (10133464)
森田 貴雄 日本歯科大学, 新潟生命歯学部, 准教授 (20326549)
戸谷 収二 日本歯科大学, 新潟生命歯学部, 准教授 (20287791)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | Ca拮抗薬 / 薬物性口腔乾燥症 / プロテオーム解析 / 唾液バイオマーカー |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究の目的は，Ca拮抗薬服用者の口腔乾燥症を確実に診断するための唾液バイオマーカーを決定し，薬物性の口腔乾燥症の確定診断を行うことである。そのために，唾液中タンパク質のプロテオーム解析とmicroRNA のマイクロアレイ解析で特徴づけられたタンパク質とRNAから，Ca拮抗薬服用者の特徴を明らかにし，Ca拮抗薬による口腔乾燥症に特有の唾液バイオマーカーを決定することを最終目的としている。
平成３０年度は，Ca拮抗薬による口腔乾燥症に特有の唾液バイオマーカーを決定するべく，Ca拮抗薬服用の口腔乾燥症患者２名，内服薬のない健常高齢者１名の安静時唾液を用いて，唾液中タンパク質のiTRAQプロテオーム解析を委託して行う研究実施計画であった。平成３０年度は，唾液中タンパク質のiTRAQプロテオーム解析の委託先を検討し，実際に，Ca拮抗薬服用の口腔乾燥症患者２名，内服薬のない健常高齢者１名の安静時唾液を用いて，唾液中タンパク質のiTRAQプロテオーム解析を行った。併せて，シェーグレン症候群患者の特徴も調べ，Ca拮抗薬服用の口腔乾燥症患者と比較検討を行うため，シェーグレン症候群患者１名の安静時唾液を用いて，唾液中タンパク質のiTRAQプロテオーム解析を行った。解析に時間を要するとのことで，平成３０年度に委託を行ったが，解析結果は平成３１年度に持ち越すこととなった。
また，平成３０年度は，国内学会での研究成果発表を行うことができた。さらに，平成３０年度の研究成果を論文にまとめ，現在投稿中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
平成３０年度は，当初の研究実施計画通り，Ca拮抗薬服用の口腔乾燥症患者２名，内服薬のない健常高齢者１名の安静時唾液を用いて，唾液中タンパク質のiTRAQプロテオーム解析を行い，併せて，シェーグレン症候群患者の特徴も調べてCa拮抗薬服用の口腔乾燥症患者と比較検討を行うため，シェーグレン症候群患者１名の安静時唾液を用いて，唾液中タンパク質のiTRAQプロテオーム解析を行った。
また，平成３０年度の研究成果から論文を作成し，現在投稿中である。
唾液中タンパク質のiTRAQプロテオーム解析の委託先を検討してからの解析となり，また，解析に時間を要するとのことで，平成３０年度に解析結果は出なかったため，次年度に結果の分析を行っていく。
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| Strategy for Future Research Activity |
平成３１年度は，平成３０年度に行った唾液中タンパク質のiTRAQプロテオーム解析結果の分析を行い，抽出したタンパク質の抗体を購入，あるいは委託して作成し，Ca拮抗薬服用の口腔乾燥症患者20検体および内服薬のない健常高齢者20検体を被験体として，Western blottingによりCa拮抗薬服用者に特徴的なタンパク質の検出確認を行う。
また，当初の研究実施計画である，Ca拮抗薬服用の口腔乾燥症患者３名と内服のない健常高齢者３名の安静時唾液から抽出したRNAを用いて行ったmicroRNAのマイクロアレイ解析結果の分析を行い，Ca拮抗薬服用者の唾液において健常高齢者と比較して特徴的に検出されるRNAを抽出する計画である。その後，リアルタイムPCRによるRNAレベルの測定と標的遺伝子の検出確認を行い，統計処理をして，唾液バイオマーカーを確定する。平成３１年度の研究成果発表を行い，論文を作成する。
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| Causes of Carryover |
平成３０年度には，唾液中タンパク質のiTRAQプロテオーム解析を委託して行うために，高額の予算を見積もっていた。平成３０年度中にiTRAQプロテオーム解析を委託して行ったが，解析に時間を要するため，納品が平成３１年度となった。そのため，次年度使用額が生じたが，平成３１年度に納品後に使用する予定である。
また，解析結果の分析を行った後，抽出したタンパク質の抗体を購入，あるいは委託して作成するのに使用する予定である。
その他，Western blottingやリアルタイムPCRの関連試薬に経費を使用する計画である。
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Research Products
(17 results)
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[Presentation] Ca拮抗薬による口腔乾燥症患者の唾液タンパク質の分析―第2報―2018
Author(s)
水橋 史, 小出 馨, 梨田智子, 戸谷収二, 近藤敦子, 浅沼直樹, 佐藤利英, 渡會侑子, 栗田 武, 小林 博, 内田剛也
Organizer
公益社団法人日本補綴歯科学会第127回学術大会
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