2018 Fiscal Year Research-status Report
光遺伝学的手法を用いたオレキシンの咀嚼運動に関わる調節機構の解明
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18K09689
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| Research Institution | Showa University |
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Principal Investigator |
池田 美菜子 昭和大学, 歯学部, 助教 (90551268)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
井上 富雄 昭和大学, 歯学部, 教授 (70184760)
馬場 一美 昭和大学, 歯学部, 教授 (80251536)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | オレキシン / 三叉神経運動核 / 三叉神経中脳路核 / 光遺伝学 / 薬理遺伝学 / ブラキシズム / スボレキサント |
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| Outline of Annual Research Achievements |
神経ペプチドであるオレキシンは運動ニューロンが存在する三叉神経運動核に作用し、咀嚼筋活動を亢進する作用を示す。我々は、オレキシンは感覚ニューロンが存在する三叉神経中脳路核に対して神経活動を抑制することを見出した。過去の咀嚼運動に関する報告のほとんどは、オレキシンの三叉神経運動核への影響を検討したもので、三叉神経中脳路核への作用を調べた研究は皆無であり、オレキシンの感覚ニューロンの抑制作用は、咬合感覚の精度を上げてスムーズな咀嚼運動を遂行するのに深く関与していることを示唆する。そこで本研究では、生理的状態のオレキシンが三叉神経領域を介して咀嚼運動にどのように影響するのか、さらにオレキシンの三叉神経中脳路核に対する抑制作用が咀嚼運動にどのように影響するのか、生体レベルで解明することが目的である。これらの因果関係を明確に示せれば、現在、睡眠導入剤として日本で処方されているオレキシン受容体拮抗薬「スボレキサント（ベルソムラ）」が咬合感覚異常やブラキシズムの治療薬となると期待できる。
平成30年度は、まず基礎データとして、三叉神経運動核の周囲にオレキシン神経からの投射があるかどうか検討した。両側の三叉神経運動核に逆行性のAAVベクターであるAAV-CAG-tdTomatoを注入し、脳切片を作製して観察したところ、オレキシン産生ニューロンから三叉神経運動核周囲に投射があることが確認できた。このことから、オレキシンが三叉神経運動核に何らかの影響を及ぼす可能性が示唆される。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
平成30年度は、まず三叉神経運動核の周囲にオレキシン神経からの投射があるかどうか検討した。両側の三叉神経運動核に逆行性のAAVベクターであるAAV-CAG-tdTomatoを注入し、脳切片を作製して観察したところ、オレキシン産生ニューロンから三叉神経運動核周囲に投射があることが確認できた。このことから、オレキシンが三叉神経運動核に何らかの影響を及ぼす可能性が示唆される。
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| Strategy for Future Research Activity |
オレキシン産生ニューロン特異的にDNA 組み換え酵素であるCreリコンビナーゼを発現するトランスジェニックマウス（Orexin‐EGFP‐Cre mouse ： RBRC06806,理研バイオリソースセンターから購入）にレンチウイルスベクターを用いてCre依存的にChR2 を発現させ、青色光照射によりオレキシン産生ニューロンを活性化するOrexin‐ChR2マウスを作製する。
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| Causes of Carryover |
平成30年度内に、オレキシン産生ニューロン特異的にDNA 組み換え酵素であるCreリコンビナーゼを発現するトランスジェニックマウス（Orexin‐EGFP‐Cre mouse ： RBRC06806,理研バイオリソースセンターから購入）にレンチウイルスベクターを用いてCre依存的にChR2を発現させ、青色光照射によりオレキシン産生ニューロンを活性化するOrexin‐ChR2マウスを作製することを予定したが、平成31年度に購入することにした。
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