Intrathrombotic appearances of AQP-1 and AQP-3 in relation to thrombus age in murine deep vein thrombosis model

2020 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18K10134
• Research Institution: Wakayama Medical University
• Principal Investigator: 野坂 みずほ 和歌山県立医科大学, 医学部, 講師 (00244731)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 近藤 稔和 和歌山県立医科大学, 医学部, 教授 (70251923) ; 石田 裕子 和歌山県立医科大学, 医学部, 准教授 (10364077)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: 深部静脈血栓塞栓症 / アクアポリン１ / アクアポリン３ / マクロファージ / 免疫組織化学的染色

Outline of Annual Research Achievements

深部静脈血栓症（DVT）は今後さらに増え続けることが予想され，それに伴い，剖検時に深部静脈血栓が発見される例や，その血栓が死因や死後経過時間推定に重要な意味を持つ場合も増えることが予想される．本研究課題では，実験用マウスの下大静脈を結紮して作成したDVTモデルを用いて①アクアポリン１，３による新たな血栓陳旧度判定指標の確立，②アクアポリン1の動態の血栓器質化の進行程度の評価への適用，等に重点を置いて研究を推進した．対象としては，下大静脈結紮から1，3，5，7，10，14，21日後の血栓を用いた．血栓の断面組織標本について，抗アクアポリン１，３抗体それぞれを用いた免疫組織化学的染色像から陽性細胞数を計測し，これらの血栓内における動態を評価した．
すでに人体におけるアクアポリンの動態は様々な疾患との関連が明らかにされている．腫瘍細胞遊走と脈管形成ではアクアポリン１が重要な役割を担っており，アクアポリン１の発現を阻害することが癌進展を阻害する可能性が報告されている．また唾液の分泌や血圧，急性脳水腫，椎間板変性，アルツハイマー病との関わりも重要である．
本研究課題により，アクアポリン1及び３の深部静脈血栓における局在や動態と，血栓陳旧度との関連性を明らかにし，血栓陳旧度判定のための新たな指標の有用性が示唆された．血栓断面積に占めるアクアポリン１陽性領域は急性期（3日まで）には70%以上に達したが，亜急性期（5~10日）には40%前後に減少し，さらに慢性期（14日以降）には20%以下だった．アクアポリン1により，血栓陳旧度と器質化の程度を検索可能であることが分かった．一方，血栓中のアクアポリン3陽性細胞数は時間経過に伴い徐々に増加し，10日目で最多となり，その後減少した．血栓内マクロファージの発現と関連していることが示唆されると同時に，血栓陳旧度が推定可能であることも明らかになった．

Research Products

• [Journal Article] Complete decapitation by a self-constructed guillotine in a burned body ? complex suicide or postmortem burning? (2021)
  • Author(s): Ishigami A, Hata S, Ishida Y, Nosaka M, Kuninaka Y, Yamamoto H, Shimada E, Hashizume Y, Takayasu T, Kimura A, Furukawa F, Kondo T
  • Journal Title: Int J Legal Med Volume: 135 Pages: 301-305
  • DOI: 10.1007/s00414-020-02323-y
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Intrathrombotic appearances of AQP-1 and AQP-3 in relation to thrombus age in murine deep vein thrombosis model (2021)
  • Author(s): Nosaka M, Ishida Y, Kuninaka Y,Ishigami A, Taruya A, Shimada E, Hashizume Y, Yamamoto H, Kimura A, Furukawa F, Kondo T
  • Journal Title: Int J Legal Med Volume: 135 Pages: 547-553
  • DOI: 10.1007/s00414-020-02482-y
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] The application of autophagy to thrombus age estimation in murine deep vein thrombosis model. (2020)
  • Author(s): Nosaka M, Ishida Y, Kuninaka Y, Taruya A, Kimura A, Shimada E, Yamamoto H, Michiue T, Furukawa F, Kondo T.
  • Journal Title: Int J Legal Med Volume: 134 Pages: 1061-1066
  • DOI: 10.1007/s00414-019-02168-0
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] Prevention of CaCl2-induced aortic inflammation and subsequent aneurysm formation by the CCL3-CCR5 axis (2020)
  • Author(s): Ishida Y, Kuninaka Y, Nosaka M, Kimura A, Taruya A, Furuta M, Mukaida N, Kondo T
  • Journal Title: Nat Commun Volume: 25 Pages: 5994
  • DOI: 10.1038/s41467-020-19763-0
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] 血栓陳旧度判定に有用だったIL-6は血栓の予防・治療のための新たな標的分子となり得るか (2020)
  • Author(s): 野坂 みずほ，石田 裕子，國中 由美，石上 安希子，山本 寛記，橋爪 佑示子，島田 栄美，川口 真理子，木村 章彦，近藤 稔和
  • Organizer: 第104次日本法医学会学術全国集会
• [Presentation] マウス拘束モデルにおける胸腺萎縮へのCX3CR1の関与 (2020)
  • Author(s): 石田裕子，國中由美，野坂みずほ，石上安希子，島田栄美，山本寛記，川口真理子，近藤稔和
  • Organizer: 第104次日本法医学会学術全国集会
• [Presentation] 頸部が離断された高度焼損死体の一剖検例 (2020)
  • Author(s): 石上安希子，石田裕子，野坂みずほ，國中由美，山本寛記，島田栄美，高安達典，木村章彦，近藤稔和
  • Organizer: 第104次日本法医学会学術全国集会
• [Presentation] マウス血栓溶解におけるIL-6の役割―マクロファージとタンパク分解酵素発現の誘導― (2020)
  • Author(s): 野坂みずほ，石田裕子，石上安希子，國中由美，山本寛記，橋爪佑示子，木村章彦，向田直史，近藤稔和
  • Organizer: 第41回日本炎症・再生医学会
• [Presentation] Prevention of CaCL2-induced aortic inflammation and subsequent aneurysm formation by CCL3 (2020)
  • Author(s): 石田裕子，國中由美，野坂みずほ，木村章彦，樽谷 玲，古田眞智，向田直史，川口真理子，近藤稔和
  • Organizer: 第41回日本炎症・再生医学会
• [Presentation] CCL2-mediated reversal of impaired skin wound healing diabetic mice by normalization of neovascularization (2020)
  • Author(s): Ishida Y, Kuninaka Y, Nosaka M, Akiyama M, Mukaida N, Kawaguchi M, Kondo T
  • Organizer: 8th Annual Meeting of the International Cytokine & Interferon Society
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Absence of CCL5/CCR5 axis exggerates thrombus formation through reduced uPA, tPA and VEGF expression in murine DVT model (2020)
  • Author(s): Nosaka M, Ishida Y, Kuninaka Y, Ishigami A, Yamamoto H, Kimura A, Mukaida N, Kondo T
  • Organizer: 8th Annual Meeting of the International Cytokine & Interferon Society
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Prevention of CaCl2-induced aortic inflammation and subsequent aneurysm formation by CCL3 (2020)
  • Author(s): 石田 裕子，國中 由美，野坂みずほ，木村 章彦，樽谷 玲，向田 直史，近藤 稔和
  • Organizer: 第50回日本創傷治癒学会
• [Presentation] マウス深部静脈血栓の溶解におけるIL-6 の役割―マクロファージとタンパク分解酵素発現の誘導― (2020)
  • Author(s): 野坂みずほ，石田 裕子，石上安希子，國中 由美，山本 寛記，橋爪佑示子，木村 章彦，向田 直史，近藤 稔和
  • Organizer: 第50回日本創傷治癒学会
• [Presentation] 関節内ヒアルロン酸注射による壊死性筋膜炎の一剖検例 (2020)
  • Author(s): 松木順平，石上安希子，田中基就，石田裕子，野坂みずほ，山本寛記，國中由美，島田栄美，川口真理子，木村章彦，古川福実，近藤稔和
  • Organizer: 第67回日本法医学会学術近畿地方集会
• [Presentation] 複合自殺例の法医学的検討 (2020)
  • Author(s): 田中基就，橋爪佑示子，石上安希子，松木順平，石田裕子，野坂みずほ，山本寛記，國中由美，島田栄美，川口真理子，木村章彦，古川福実，近藤稔和
  • Organizer: 第67回日本法医学会学術近畿地方集会