2019 Fiscal Year Annual Research Report
The rule of microRNA links between platelets and infection..diseaese
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18K15395
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Research Institution | Kagoshima University |
Principal Investigator |
郡山 豊泰 鹿児島大学, 医歯学域鹿児島大学病院, 臨床検査技師 (60723616)
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Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2020-03-31
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Keywords | microRNA / マクロファージ / サイトカイン / RICTOR |
Outline of Annual Research Achievements |
本申請では、細菌感染した免疫細胞からのmicroRNAが血小板へ与える細胞間コミュニケーションのツールとしてなり得るかを知る前段階として「レジオネラ菌感染がマクロファージに及ぼす形質変化の分子機序解明」を目的とし、次の2点についてin vitroで検討をおこなった。 (1) L. pneumophila をマクロファージ(宿主)に感染させたときのマクロファージのmiRNA発現量の量的・質的変化を検討した。 (2) 得られた結果よりmiR-218に注目し、miR-218がL. pneumophila 感染したマクロファージにどのような機能変化をもたらすかを検討した。 細胞実験は、ヒト単核球系細胞 (U937細胞)を使用し、phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA: 50ng/mL)で2日間分化させたものをマクロファージ様細胞として使用した 。miRNAおよびmRNAの発現はリアルタイムPCRを使用した。蛋白質発現の評価は、ウェスタンブロット法を用いた。今回、miR-218のターゲットとしたRICTORは、mTOR複合体のmTORC2の構成タンパク質の一つである。RICTORのノックダウンおよびmiR-218の発現増強、減弱には、Lipofectamine RNAiMAX とRICTOR silencing RNAおよびmiR-218 mimics・miR-218 inhibitorを細胞内に導入し、細胞機能変化を解析した。 今回、申請者はL. pneumophila 感染によるマクロファージのサイトカイン産生の制御に、miR-218が関与することと、miR-218で発現が抑制されるRICTORの役割を初めて明らかにした。
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[Journal Article] Liver abscess due to Sterigmatomyces halophilus in a boy with acute lymphoblastic leukemia.2019
Author(s)
Imashioya T, Kodama Y, Ooka T, Nakagawa S, Nishikawa T, Tanabe T, Okamoto Y, Imuta N, Kirishima M, Tanimoto A, Koriyama T, Nishi J, Kawano Y.
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Journal Title
J Infect Chemother
Volume: 25
Pages: 1047-1049
DOI
Peer Reviewed