2021 Fiscal Year Research-status Report
Dervelopment of rapid diagnostic kits on viral infections from and/or to Japan and the neighboring countries
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18KK0271
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
生田 和良 大阪大学, 微生物病研究所, 招へい教授 (60127181)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐々木 正大 大阪大学, 微生物病研究所, 助教 (20547533)
山元 誠司 地方独立行政法人 大阪健康安全基盤研究所, 微生物部, 主任研究員 (20649008)
改田 厚 地方独立行政法人 大阪健康安全基盤研究所, 微生物部, 主幹研究員 (50372131)
中田 恵子 地方独立行政法人 大阪健康安全基盤研究所, 微生物部, 主任研究員 (50516747)
上林 大起 地方独立行政法人 大阪健康安全基盤研究所, 微生物部, 研究員 (50622560)
倉田 貴子 地方独立行政法人 大阪健康安全基盤研究所, 微生物部, 主任研究員 (70435890)
青山 幾子 地方独立行政法人 大阪健康安全基盤研究所, 微生物部, 主任研究員 (90332452)
本村 和嗣 地方独立行政法人 大阪健康安全基盤研究所, 微生物部, 課長 (60450558)
池森 亮 地方独立行政法人 大阪健康安全基盤研究所, 微生物部, 研究員 (90827255)
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| Project Period (FY) |
2018-10-09 – 2023-03-31
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| Keywords | 麻しんウイルス / 風しんウイルス / エンテロウイルス / SFTSウイルス / マウス単クローン抗体 / イムノクロマトキット / ELISA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究課題の目的は、東南アジアからの輸入感染症（麻疹、風疹、手足口病、重症熱性血小板減少症候群（SFTS)）の水際対策確立を目的として、それぞれの迅速迅速診断キットを開発することである。これまでに得られている成果の状況は以下のとおりである。
麻疹および風疹：麻疹ウイルスNucleoprotein（MV-N）及び風疹ウイルスCapsid protein（RV-C）に対するマウス単クローン抗体を作製した。これまでのスクリーニングにより、ウイルスと強く反応する抗体を産生するハイブリドーマクローンを選出し、精製抗体を調整した。また、MV-N及びRV-Cに対するウサギポリクローン抗体を作製した。現在までに、ELISAとイムノクロマトキットの作製を試みているが、感度及び特異度を満たす、実用性のあるレベルのキット作製には至っていない。今後、これら単クローン抗体を用いて、抗原検出イムノクロマトキット及び抗原検出ELISA法の開発を試みる。
手足口病：当研究所で分離したエンテロウイルス71株の、培養細胞、マウス脳で増やした後の精製ウイルス粒子で免疫し、これまでにIF法でのスクリーニング
で数個の特異抗体産生株を得ている。WB法とELISAによるエンテロウイルス71株との特異性を確認し、イムノクロマトキットを作製したが、感度が不十分なため、実用性のあるキット作製には至っていない。
SFTS：大阪健康安全基盤研究所で分離したSFTSウイルス株2種（J1日本型、C5中国型）をマウス細胞株（B7)に順化し、感染B7細胞に不活化処理を実施し、マウスに免疫した。これまでにIF法でのスクリーニングで数クローンの特異抗体産生株を樹立している。現在までに、イムノクロマトキットを作製し、迅速診断可能なキット作製に成功している。現在、その感度と特異度について検討している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
理由
目標としている４つの感染症の病原体ウイルスに対して、マウス単クローン抗体の作製は順調に進み、ELISA系及びイムノクロマトキットを開発中である。また、ウサギのポリクローナル抗体も作製できている。キットが開発できた際の有効性評価実施のための、国際共同研究グループとの事前打ち合わせに、それぞれの国を訪問する予定であったが、新型コロナウイルス発生の影響で、予定していた回数の打ち合わせができていない。これまでにタイと中国は訪問できているが、インドネシアを訪問することができていない。また、イムノクロマトキットの開発は研究協力者の小坂（マルホ株式会社）が進めているが、こちらも新型コロナウイルス感染症蔓延の影響で開発が遅れていたが、徐々にキットの作製ができる状況になってきた。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後、イムノクロマトキットの開発が進めば、その迅速診断キットとしての有効性評価について、国際共同研究グループ（タイ、インドネシア、中国）との連携により進めていきたい。今後の新型コロナの蔓延状況にもよるが、今年度中に実施する予定である。
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| Causes of Carryover |
新型コロナウイルス感染症の蔓延で、その行政検査を担当している大阪健康安全基盤研究所職員が、本研究メンバーでもあったために、本年度も計画通りに本事業を進めることができなかった。特に、これまでに、本研究の国際共同研究グループ先である中国、タイには1回のみの訪問で、インドネシアには訪問の機会を作ることもできなかった。そのため、研究年間延長を行い、イムノクロマト法による迅速診断キットを作製し、近隣諸国を行き来する感染症、特に本研究課題でフォーカスしている麻疹、風疹、手足口病、ＳＦＴＳについて、それぞれ実用的な感度、特異度を伴ったイムノクロマトキットの開発を目指す。
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Research Products
(5 results)
