2007 Fiscal Year Annual Research Report
細胞小胞輸送に関わる低分子量GTP結合蛋白質の蛍光イメージングによる時空間的解析
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19209008
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
松田 道行 Kyoto University, 生命科学研究科, 教授 (10199812)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中村 岳史 京都大学, 生命科学研究科, 講師 (60362604)
清川 悦子 京都大学, 生命科学研究科, 助教 (80300929)
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| Keywords | FRET / G蛋白 / Ral / R-Ras / 小胞輸送 |
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| Research Abstract |
Rabファミリー低分子量GTP結合蛋白およびArfファミリー低分子量GTP結合蛋白の活性化モニターの作成を行った。また、Rasファミリー低分子量GTP結合蛋白の一つR-RasのFRETプローブを作成し、R-Rasの機能を解析した。R-Ras蛋白に対する良い抗体がなかったのでまず抗体を作成した。この抗体を用いて組織内分布および細胞内分布を調べた。R-Rasは平滑筋にもっとも多く発現しており、次いで、副腎髄質および膵臓ランゲルハンス氏島に多く発現していた。細胞内では、初期およびリサイクリングエンドソーム上に存在していた。このことはR-Rasが細胞外分泌に関与することを示唆する結果である。さらにFRETプローブでRRasの活性を調べたところ、エンドソーム上で活性が強いことがわかった。エンドソームにおいてはRalAの活性も高いことを我々は報告している。そこで、R-Rasに結合するRalA活性化因子を調べたところ、このエンドソーム上でR-RasがRal活性化因子であるRgl2/Rlfと結合していることを見出した。RNAiによりR-Rasの量を減らすと、RalAの活性が低下したことからR-RasがRalAのエンドソーム上での活性化を制御していることが明らかとなった。さらに、PC12細胞および下垂体細胞を用いて細胞外分泌におけるR-RasおよびRalAの影響を解析し、R-Ras-RalA経路がホルモン分泌に関与するという結果を得た。
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[Journal Article] R-Ras regulates exocytosis by Rgl2/Rlf-mediated activation of RalA on endosomes.2007
Author(s)
A. Takaya, A. Kamio, M. Masuda, N. Mochizuki, H. Sawa, M. Sato, K. Nagashima, A. Mizutani, A. Matsuno, E. Kiyokawa, and M. Matsuda
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Journal Title
Mol. Biol. Cell 18
Pages: 1850-1860
Peer Reviewed
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