2007 Fiscal Year Annual Research Report
上皮間葉転換誘導因子を標的とする卵巣癌の抗癌剤感受性増強と転移抑制治療法の開発
| Project/Area Number |
19390427
|
|---|
| Research Institution | Nagoya University |
|---|
Principal Investigator |
吉川 史隆 Nagoya University, 大学院・医学系研究科, 教授 (40224985)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
那波 明宏 名古屋大学, 大学院・医学系研究科, 准教授 (90242859)
柴田 清住 名古屋大学, 医学部附属病院, 講師 (90335026)
梶山 広明 名古屋大学, 医学部附属病院, 講師 (00345886)
|
|---|
| Keywords | 上皮間葉転換(EMT) / 卵巣癌 / 腹膜播種 / TWIST / RNA-i / 形態変化 / 薬剤耐性 / タキソール |
|---|
| Research Abstract |
癌細胞が転移浸潤するときには上皮・間葉形態転換現象(Epithelial-Mesenchymal Transition:EMT)が関与する。今年度はEMT誘導転写因子であるTWISTに注目した。卵巣がんの腹膜播種は1)原発巣から腹腔内への腫瘍細胞の離脱、2)臓側あるいは腹側に広がる腹膜中皮細胞との接着、3)腹膜中皮間隙の遊走浸潤と局所増殖という3つの過程から成る。2)および3)に関して、TWISTの発現抑制が腹膜中皮と腫瘍細胞の接着に与える影響を検討した。卵巣がん細胞株HEYにおいて、RNA-iによるTWIST抑制がMET (Mesenchymal-epithelial transition)を誘導し、運動能と浸潤能を低下させ、単層培養した腹膜中皮細胞との接着を抑制した。このTWISTをノックダウンした細胞ではCD29やCD44などの接着分子とともにマトリックスプロテアーゼ2 (MMP2)や膜型MMPなどの発現が抑制され、TWISTと細胞接着・転移浸潤関連分子とのリンクが明らかとなった。我々は高濃度のRNA-iで高転移性卵巣癌細胞のTWIST発現を抑制すると一部の細胞は浮遊し、細胞内には泡沫を伴い小型円形化というアポトーシス様の形態変化を確認した。核の断片化を示す2n以下の分画増加を認めアポトーシスであることが判明した。ノックダウンにより、p53のユビキチン化を抑制するARFおよびp53の増加と、p53のユビキチン化を促進するMDM2の減少が認められ、タキソールの併用下でも相乗効果的に腫瘍発育が抑制されるという結果を得た。蛋白レベルでp53がコードしているPUMAおよびcleaved PARPの増加が確認できた。以上から、卵巣癌細胞の腹膜転移にはEMTが重要でありEMT誘導転写因子、特にTWISTのブロックにより卵巣癌の転移抑制と抗癌剤感受性増強が同時に期待された。
|
