Establishment of new gene modified moue production system

2021 Fiscal Year Final Research Report

• Project/Area Number: 19H03142
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 一般
• Review Section: Basic Section 42040:Laboratory animal science-related
• Research Institution: University of Tsukuba
• Principal Investigator: Mizuno Seiya 筑波大学, 医学医療系, 准教授 (10633141)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 久野 朗広 筑波大学, 医学医療系, 助教 (60830122) ; 藤山 知之 筑波大学, 国際統合睡眠医科学研究機構, 助教 (00635089)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 遺伝子改変マウス / ゲノム編集 / ロングリードシークエンス

Outline of Final Research Achievements

Genome editing with mouse zygotes has facilitated the creation of genetically engineered mice. However, compared to conventional gene targeting methods, the mutations in genetically engineered mice produced by genome editing are more complex. In addition, mouse zygote genome editing also result in mosaic mice. Furthermore, in many cases, dozens of founder mice are created per a project. It is necessary to detect the intended mutant allele in a large number of mice with unknown number of alleles and complex mutations. Therefore, we constructed a system to detect the intended mutant allele easily and accurately by utilizing long read sequencing technology.
We also generated several Cre knock-in mice that can be used for tissue-specific gene disruption experiments.

Free Research Field

実験動物学

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

遺伝子改変マウスは特定の遺伝子機能を生体で評価することが可能なバイオリソースである。近年のゲノム編集技術の発展は、遺伝子改変マウスを容易にし、これまでとは比較にならないほどの多くの遺伝子改変マウス系統が作出されている。また、新規参入した研究者も増加した。これらは、in vivo研究の可能性を大幅に拡張する一方、意図しない変異をもつマウスを誤って使用してしまうケースの増加にもつながる。誤った遺伝子改変マウスを利用した実験はin vivo研究の質を著しく落とす。我々が開発した簡便かつ正確に目的の変異アレルを検出するシステムは、この問題点を解決することで、確かなin vivo研究に大きく貢献する。