2020 Fiscal Year Annual Research Report
次世代型糖鎖抗体を用いた新しい臨床検査法の開発と病態解析
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19H03562
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
三善 英知 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (20322183)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
鎌田 佳宏 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (30622609)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 糖鎖抗体 / 膵臓がん / フコシル化ハプトグロビン / Mac-2bp / AFP-L3 / バイオマーカー |
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| Outline of Annual Research Achievements |
1 フコシル化ハプトグロビンを認識する次世代型糖鎖抗体10-7G mAbの検討
10-7Gを用いて膵臓がん組織を染色したところ、がん細胞で染色されたものは１例のみであった。これに対して、がん周囲の浸潤リンパ球で著明な陽性像を認めた。そこで炎症性リンパ球が著明に浸潤する炎症性腸疾患(IBD)の腸組織で免疫染色を行うと、非常に強い陽性像を認めた。またIBD患者の血中10-7G値は、健常者に比較して有意に上昇し、特に潰瘍性大腸炎では内視鏡的な重症度を反映する血中バイオマーカーであることがわかった。ROC解析の結果、現在臨床的に用いられているCRPやLRGよりも10-7G値は優れたバイオマーカーであることがわかった。さらに、in vitroの検討から、血球細胞から産生されるフコシル化ハプトグロビンの多くがハプトグロビンの前駆体であるプロハプトグロビンであることを見出した。プロハプトグロビンの産生増加を誘導する因子として、従来から知られているIL6に加え、TNF-alphaやhypoxiaが重要であることを発見した。
2 フコシル化Mac-2bpに対する次世代型糖鎖抗体を用いた研究
19-8 mAbと6-4FmAbを使って免疫染色を行った結果、前者ではがん周囲のマクロファージが後者ではがん組織が染色された。膵臓がんに加え、前立腺がんでも同様の実験を行うとともに、これらの次世代型糖鎖抗体のcharacterizeを行った。
3 AFP-L3に対する次世代型糖鎖抗体を用いた検討
いくつかの条件を変えてELISA系の確立を目指したが、高濃度のAFP-L3は測定できたが臨床的に有用な低濃度のAFP-L3を測定することはできなかった。培養肝がん細胞では、低濃度のDTTを加えることで染色効果が向上することがわかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
1: Research has progressed more than it was originally planned.
Reason
私たちが開発した次世代型糖鎖抗体がきっかけとなって、日本全国で多くの新しい糖鎖抗体が開発され、様々な病態解析、バイオマーカー、治療薬（抗体医薬）などへ発展するという波及効果を得た。また炎症性腸疾患の新しいバイオマーカーとしての10-7G値は臨床検査系の企業との共同研究にも発展し、国際特許出願にもつながった。この研究を行ってきた博士前期課程の大学院生が、第40回日本分子腫瘍マーカー奨励賞を受賞した。また、別の博士後期課程の大学院生が、10-7G抗体のエピトープ解析を行ったこと、膵臓がんの微小環境におけるフコシル化ハプトグロビンの重要性示した研究により、日本学術振興会の特別研究員に採択された。
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| Strategy for Future Research Activity |
10-7G値のバイオマーカーとしての有用性をさらに検証するとともに、この抗体が認識する生物学的機能に関しても追求してゆきたいと考えている。具体的には、プロハプトグロビンを過剰発現させたがん細胞の生物学的特性の変化を見たり、プロハプトグロビンのトランスジェニックマウスを用いた疾患モデルの系で検証したい。Mac-2bpに対する次世代型糖鎖抗体は、当初予測したものとは異なる反応性を示すことがわかった。そのため、さらに複数種類の抗体の性質を検討し、がん種を広げて病態解析を行いたいと思う。AFP-L3抗体に関しては、残念ながら直接的な臨床応用ができなかったので、本抗体を使ってもっと基礎的な細胞生物学の研究へと発展させて行きたい。そのため別のグラントなども生かして、本格的な基礎研究者の力を借りたいと思う。
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