Expression analysis of FGFR in canine mammary tumor

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K06408
• Research Institution: Nippon Veterinary and Life Science University
• Principal Investigator: 山本 昌美 日本獣医生命科学大学, 獣医学部, 准教授 (30530026)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: Dog / Mammary tumor / Cancer / FGFR / Cell line / Real-time RT-PCR

Outline of Annual Research Achievements

がんの診断・治療の標的として、悪性化に関連する様々な分子マーカーが利用されているが、線維芽細胞増殖因子受容体（Fibroblast growth factor receptor：FGFR）は新たに注目されている分子標的マーカーの一つである。ヒトではFGFRのサブタイプ1-4とがんの発生母体組織との間に関連が認められることが知られており、例えばFGFR4はヒトの消化器癌（胃癌、大腸癌、膵癌）や乳癌、卵巣癌、前立腺癌、などにおける過剰発現が報告されている。しかしイヌをはじめとする動物の腫瘍組織におけるFGFR発現については解析が進んでいない。
昨年度は、FGFR1-4の抗体を用いてイヌの乳腺の正常組織と腫瘍組織においてのタンパク発現を免疫組織化学染色によって確認をおこなった。今年度は乳腺腫瘍の組織解析数を増やし組織マイクロアレイ（Tissue Microarray：TMA）の作製を進めるとともに、昨年解析途中であったイヌ乳腺細胞株乳腺癌細胞(CIPp、CTBp、CNMp、CHMp、NV-CML、17-442)およびその転移巣由来細胞株でのイヌFGFR1-4の発現を、Taqman Probeを用いたreal-time　RT-PCRによって解析した。その結果、細胞株におけるFGFR1-4の発現に細胞株ごとに差が認められたが、上皮間葉転換や増殖能などの悪性形質に関わるマーカーと発現との相関は明らかではなかった。このことから、さらにアイソフォームを含めた解析をおこなうため、検索を進めている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

当初の計画よりもやや遅れている。新型コロナウイルスの感染流行により、一時期研究活動を停止せざるを得ない状況となったことに加え、解析に用いたイヌ乳腺細胞株でのFGFRの発現が予想より低く、発現調整による解析に変更が必要となったことがその理由である。

Strategy for Future Research Activity

上に示した理由によって解析が遅れていることから、今年度は続けて個別の腫瘍組織検体を増やし、そこからTMAを作製するとともに、検索する細胞株とFGFRアイソフォームも含めたRNA発現解析条件の検討をおこない、分子生物学的解析を進める。

Causes of Carryover

新型コロナ感染流行の影響で、一時期研究活動を停止せざるを得なくなったことと、学会出張に関わる経費が使用されなかったことなどによる。今後、計画よりやや遅れている解析を進めていくために、使用する予定である。

Research Products

• [Journal Article] FGFR4 Inhibitor BLU9931 Attenuates Pancreatic Cancer Cell Proliferation and Invasion While Inducing Senescence: Evidence for Senolytic Therapy Potential in Pancreatic Cancer (2020)
  • Author(s): Sasaki Norihiko、Gomi Fujiya、Yoshimura Hisashi、Yamamoto Masami、Matsuda Yoko、Michishita Masaki、Hatakeyama Hitoshi、Kawano Yoichi、Toyoda Masashi、Korc Murray、Ishiwata Toshiyuki
  • Journal Title: Cancers Volume: 12 Pages: 2976～2976
  • DOI: 10.3390/cancers12102976
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Journal Article] An Oncogenic Alteration Creates a Microenvironment that Promotes Tumor Progression by Conferring a Metabolic Advantage to Regulatory T Cells (2020)
  • Author(s): Shogo Kumagai, Yosuke Togashi, Chika Sakai, Akihito Kawazoe, Masahito Kawazu, Toshihide Ueno, Eiichi Sato, Takeshi Kuwata, Takahiro Kinoshita, Masami Yamamoto, Sachiyo Nomura, Tetsuya Tsukamoto, Hiroyuki Mano, Kohei Shitara, Hiroyoshi Nishikawa
  • Journal Title: Immunity Volume: 14 Pages: 187～203
  • DOI: 10.1016/j.immuni.2020.06.016.
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Established fibrous peritoneal metastasis in an immunocompetent mouse model similar to clinical immune microenvironment of gastric cancer (2020)
  • Author(s): Daisuke Fujimori, Jun Kinoshita, Takahisa Yamaguchi, Yusuke Nakamura, Katsuya Gunjigake, Takashi Ohama, Koichi Sato, Masami Yamamoto, Tetsuya Tsukamoto, Sachiyo Nomura, Tetsuo Ohta, Sachio Fushida
  • Journal Title: BMC Cancer Volume: 20 Pages: 1014
  • DOI: 10.1186/s12885-020-07477-x
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research