2019 Fiscal Year Research-status Report

優れた有効性と低い副作用を同時に実現する、人工カチオン性分子連結核酸医薬の開発

Research Project

Project/Area Number	19K06993
Research Institution	Tokyo Medical and Dental University
Principal Investigator	原倫太朗東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, プロジェクト講師 (70709766)
Project Period (FY)	2019-04-01 – 2022-03-31
Keywords	アンチセンス核酸 / 人工カチオン性分子 / 核酸医薬 / メジャーグルーブ
Outline of Annual Research Achievements	本研究は、核酸医薬の一つであるアンチセンス核酸医薬（ASO）の高機能化を目的とし、人工カチオン性分子（ACM）をASOと共有結合的に連結した、ACM-ASOを開発するものである。ここで用いるACMは申請者が開発した分子であり、ASOと相補RNA鎖から成るASO/RNA二本鎖に特異的に結合する性質を有するカチオン性分子のことを指す。初年度は、ACMとして、申請者らが開発した人工カチオン性ペプチドであるDabオリゴマー用いて研究を進めた。すなわちDabオリゴマーを共有結合により連結させた、Dab-ASOを合成することを目的とした。まず、モデル基質として天然型DNA（化学修飾のないDNA）を用いてDab-DNAの合成を試み、種々の条件検討の結果Dab-DNAを単離することができた。これを踏まえ、次に多数の化学修飾を含む16量体のASOを用い、同様の条件でDab-ASOの合成を試みた。しかしながら、Dab-ASOの単離には至らなかった。生成したDab-ASOが反応や精製過程で凝集を起こすなどで不溶化していることが一因と考えている。先に述べたDab-DNAの合成においても、条件によっては同様に目的化合物が回収できない場合があることがあったが、反応条件や後処理方法の検討により、Dab-DNAを単離することに成功していた。これらの知見をもとに、ACM-ASOの反応効率と精製（回収）効率を向上させるための実験系の最適化を進めているところである。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 3: Progress in research has been slightly delayed. Reason モデル基質でのDab8-DNA合成は問題なく行えたものの、化学修飾されたASOを用いた場合にDab8-ASOを単離出来ていない。当初計画では初年度にACM-ASOの合成法は確立できると見込んでいたため、このように自己評価する。
Strategy for Future Research Activity	目的物の回収率を改善するための、ACM-ASOのコンジュゲーション反応条件や、その後の精製条件の最適化を現在行っている。また、ACMとASOの相性（相互作用の強さ）と、ACM-ASOの凝集性は関係があると考えられるため、現在用いているものよりもASO結合性の低いACMを用いてACM-ASOの合成を試みる予定である。