優れた有効性と低い副作用を同時に実現する、人工カチオン性分子連結核酸医薬の開発

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K06993
• Research Institution: Tokyo Medical and Dental University
• Principal Investigator: 原 倫太朗 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, プロジェクト講師 (70709766)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: アンチセンス核酸 / 人工カチオン性分子

Outline of Annual Research Achievements

本研究は、核酸医薬の一つであるアンチセンス核酸医薬（ASO）の高機能化を目的とし、人工カチオン性分子（ACM）をASOと共有結合的に連結した、ACM-ASOを開発するものである。昨年度の検討により、天然型DNA（化学修飾）を用いたACM-DNAと比較して、化学修飾を有するASOを用いたACM-ASOは凝集しやすく、合成、精製が困難であることが明らかとなった。そこで本年度はACM-ASOの合成、精製、分析法の詳細な検討を行った。ACMのカチオン性官能基の種類（アミノ基、グアニジノ基）や数（凝集性を抑制するためのカチオン数の低減）、またコンジュゲーション反応の種類を検討した。いくつかの系で凝集せずに、反応の進行を確認しているが高純度のACM-ASOの単離、同定には至っていない。一つの要因として、昨年度からACMとして主に検討に用いていたDabオリゴマーは、一部精製、分析条件でやや不安定であることが、精製、分析の各工程を困難としていることが考えられた。そこで、現在、より安定なAgpオリゴマーを搭載したACM-ASOを用いた精製、分析法の検討を並行して進めている。また、質量分析用の試料調製におけるACM-ASOの凝集が懸念されたことから、精製後になるべく後処理を経ずに質量分析を行う分析系の準備を進めている。これまでに高塩濃度の核酸水溶液を用いた場合でも高感度の分析が可能なMALDI-TOF MSの実験条件を確立した。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

ACMの種類にも依存するが、ACM-ASOの精製、及び分析における問題点が明らかになってきている。当初の計画どおりには高純度のACM-ASOを取得できておらず、このように自己評価する。

Strategy for Future Research Activity

ACM-ASOの精製後、凝集を経ずに質量分析を行う一連のプロセスを確立する。精製、分析の各手法の改良により、高純度のACM-ASOを取得する。