2019 Fiscal Year Research-status Report
Pathogenomic analyses of the collagen disease therapeutic model using recombinant inbred mice.
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19K07478
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| Research Institution | Gifu University |
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Principal Investigator |
宮崎 龍彦 岐阜大学, 医学部附属病院, 准教授 (80239384)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 実験病理学 / 膠原病治療モデル / リコンビナント・インブレッド / ゲノム病理学的解析 / 蛋白アナログ |
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| Outline of Annual Research Achievements |
１．Opn-インテグリン結合阻害蛋白の確立：すでにこれまでの研究でOpnの蛋白多型が自己免疫性糸球体腎炎感受性を規定すること、それをブロックする蛋白アナログを明らかにしており、さらに低分子化をはかったアミノ酸をデザインし、コムギ胚芽を用いた無細胞蛋白合成システムを用いて合成し、in vitroでOpn-インテグリン結合阻害効果の検証を行った。in vitro実験で効果の見られた数種類の蛋白アナログのうち一種類について、in vivoでリンパ節投与、静脈投与、腹腔内投与し、効果を比較した。
２．自己抗原エピトープデコイ蛋白の確立：腎炎原性自己抗原であるRRP8とTNP1に対するデコイ蛋白を確立するために、無細胞蛋白合成システムで合成したRRP8およびTNP1について全長および一部のタンパクを合成し、血清との反応性を免疫沈降法で解析し、反応性のあるfragmentをデコイ蛋白として絞り込む作業の一部を行った。
３．Opn-インテグリン結合阻害蛋白、自己抗原デコイ蛋白、およびシクロフォスファミド投与による膠原病治療モデルの実施と、治療反応性の解析：4ヶ月齢～６ヶ月齢の腎炎発症した個体を使用する。Opn-インテグリン結合阻害蛋白、自己抗原デコイ蛋白または陽性コントロールとしてシクロフォスファミドを経尾静脈的、経左鼠径部リンパ節的もしくは腹腔内に投与した。陰性コントロールとしては同様に生理食塩水を投与した。二ヶ月間薬剤を投与し、投与期間中の尿蛋白、体重を測定した。投与終了後速やかに剖検して腎臓および、血管、関節、唾液腺、涙腺の各臓器病変について組織学的に評価している。さらに、剖検時に血清を採取し、腎機能、炎症マーカー、免疫グロブリン、補体を定量した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
Opn-インテグリン結合阻害蛋白の低分子化を図っているが、in vitroでの阻害効果の検証にやや手間取っている。また、RRP8およびTNP1のデコイ蛋白の合成につき、年度末からコロナ感染防止のために、共同研究部分がやや滞っている。その代わりに、既存の投与系へのin vivo解析をn数を増やして先行させ、データ解析を進めている。
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| Strategy for Future Research Activity |
低分子化した結合阻害蛋白、デコイ蛋白の合成を急ぎ、今年度にはそれらを用いたin vitro, in vivoの解析を大幅に進捗させたい。また、in vivoの投与系でリコンビナント系マウスの系統間での治療効果の差について、その背景遺伝子の関与につき、予定通りの解析を進めていく。
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[Journal Article] JCS 2017 Guideline on Management of Vasculitis Syndrome- Digest Version2020
Author(s)
Isobe, M. Amano, K. Arimura, Y. Ishizu, A. Ito, S. Kaname, S. Takahashi, K. Tanemoto, K. Hasegawa, H. Harigai, M. Fujimoto, S. Miyazaki, T. et.al.
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Journal Title
Circ J
Volume: 84
Pages: 299-359
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Multi-institutional re-evaluation of prognostic factors in chromophobe renal cell carcinoma: proposal of a novel two-tiered grading2020
Author(s)
Ohashi, R. Martignoni, G. Hartmann, A. Calio, A. Segala, D. Stohr, C. Wach, S. Erlmeier, F. Weichert, W. Autenrieth, M. Schraml, P. Rupp, N. J. Ohe, C. Otsuki, Y. Kawasaki, T. Kobayashi, H. Kobayashi, K. Miyazaki, T. Shibuya, H. Tsuzuki, T. Nagashima, Y. Ajioka, Y. Moch, H. et al.
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Journal Title
Virchows Arch
Volume: 476
Pages: 409-418
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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[Journal Article] Classic Chromophobe Renal Cell Carcinoma Incur a Larger Number of Chromosomal Losses Than Seen in the Eosinophilic Subtype2019
Author(s)
Ohashi, R Schraml, P Angori, S Batavia, Aashil A Rupp, NJ Ohe, C Otsuki, Y Kawasaki, T Kobayashi, K Miyazaki, T Shibuya, H Nagashima, Y, Ajioka, Y, Moch, H et al.
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Journal Title
Cancers (Basel)
Volume: 11
Pages: 1492-1505
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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