2021 Fiscal Year Annual Research Report
Study for a molecular machinery of the host recognition by Clostridioides difficile phage to develop the advanced therapy
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19K07560
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| Research Institution | Kitasato University |
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Principal Investigator |
阪口 義彦 北里大学, 医学部, 講師 (70403491)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
加藤 はる 国立感染症研究所, 細菌第二部, 室長 (00273136)
大宮 直木 藤田医科大学, 医学部, 教授 (00335035)
内山 淳平 岡山大学, 医歯薬学域, 准教授 (20574619)
後藤 和義 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 助教 (20626593)
妹尾 充敏 国立感染症研究所, 細菌第二部, 室長 (20646624) [Withdrawn]
林 俊治 北里大学, 医学部, 教授 (40260765)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | Clostridioides difficile / C. difficile感染症 / バクテリオファージ / 宿主特異性 / 尾部吸着分子 / ディスバイオシス / 治療 / 予防 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Clostridioides (Clostridium) difficile感染症（CDI）は、抗菌薬関連下痢症・腸炎の1つであり、抗菌薬の使用等により正常な腸内微生物叢が撹乱し（ディスバイオシス）、C. difficileが過剰に増殖することにより発症する。CDIの治療では、バンコマイシンやメトロニダゾールなどの抗菌薬が有効であるが、ディスバイオシスが惹起されることもあり、再びCDIが引き起こされる。従って、原因となるC. difficileのみを特異的に殺菌する新規治療法の確立が急務である。本研究課題では、研究代表者らは、その治療候補の1つとしてバクテリオファージ（ファージ）に着目した。ファージは、宿主である細菌に対して特異的に結合し、自己の溶菌酵素により殺菌活性を示す。本ファージの特性を有効に利用したCDIの新規治療法の確立を目指し研究開発を行っている。本年度においては、2つの組換えタンパク質（His融合ORFAおよびHis融合ORFB）の発現および精製を検討した。その結果、His融合ORFAは可溶性タンパク質として精製できたが、His融合ORFBは不溶性画分に移行し精製することが困難であった。そこで、まずは、His融合ORFAのC. difficile リボタイプ027株に対する結合をEnzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) およびウェスタンブロット解析により調べたところ、濃度依存的および時間依存的な結合が認められた。現在、他のリボタイプ株に対する結合性を解析している。
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