第二経路の補体因子MASPー３の活性化機構の解明

2021 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 19K07610
• Research Institution: Fukushima Medical University
• Principal Investigator: 関根 英治 福島県立医科大学, 医学部, 教授 (40363759)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 町田 豪 福島県立医科大学, 医学部, 講師 (80583632) ; 林 学 福島県立医科大学, 医学部, 助教 (80745787)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: MASP-3 / 補体レクチン経路 / 認識分子

Outline of Annual Research Achievements

MASP-3は活性化型で循環し、第二経路のD因子を活性化する。しかし、MASP-3がレクチン経路の認識分子と複合体を形成する免疫学的意義は未だ明らかになっていない。そこで本研究では、MASP-３の活性化におけるレクチン経路の認識分子の役割を解明するために、認識分子との複合体形成能を欠く4種類の変異型リコンビナントマウスMASP-3（rmMASP-3）を作成してマウスに投与し、生体内におけるrmMASP-3の活性化動態を比較検討した。
認識分子との結合に重要な4つのアミノ酸（Glu49, Asp102, His218, Tyr225）の配列をAlaに置換した4種類の変異型rmMASP-3と野生型rmMASP-3をCHO細胞を用いて作成した。各種rmMASP-3 100μgをMASP-3欠損マウスの尾静脈内に投与して経時的に採血し、血清中の活性化型rmMASP-3をWestern blottingで検出し、各種rmMASP-3の活性化動態を比較検討した。
生体内における各種rmMASP-3の活性化動態を評価した結果、野生型およびMASP-3欠損マウスにおいて、変異型rmMASP-3は野生型rmMASP-3と同様に活性化型に変化した。しかし、野生型rmMASP-3は、投与後12時間経過後でも血清中で検出されるのに対し、変異型rmMASP-3は投与後6時間後までに検出されなくなった。
生体内において、認識分子と複合体を形成しない変異型rmMASP-3でも野生型rmMASP-3と同様に活性化型に変化したことから、MASP-3の活性化において、認識分子との複合体の形成は必要としないことが考えられた。一方、生体内において、変異型rmMASP-3は野生型rmMASP-3よりも早期にクリアランスされたことから、MASP-3とレクチン経路の認識分子との複合体の形成は、生体内におけるMASP-3の維持に寄与していることが考えられた。

Research Products

• [Int'l Joint Research] Polish Academy of Sciences(ポーランド)
  • Country Name: POLAND
  • Counterpart Institution: Polish Academy of Sciences
• [Journal Article] Polymorphisms of the FCN2 Gene 3'UTR Region and Their Clinical Associations in Preterm Newborns (2021)
  • Author(s): Anna S Swierzko, Dariusz Jarych, Gabriela Gajek, Karolina Chojnacka, Paulina Kobiela, Maja Kufelnicka-Babout, Mateusz Michalski, Katarzyna Sobczuk, Agnieszka Szala-Pozdziej, Misao Matsushita, Jan Mazela, Iwona Domzalska-Popadiuk, David C Kilpatrick, Jaroslaw Kalinka, Hideharu Sekine, Maciej Cedzynski
  • Journal Title: Front Immunol Volume: 12 Pages: －
  • DOI: 10.3389/fimmu.2021.741140
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Changes in complement activation products after anti-VEGF injection for choroidal neovascularization in age-related macular degeneration and pachychoroid disease (2021)
  • Author(s): Keiichiro Tanaka, Yasuharu Oguchi, Tomoko Omori, Yumi Ishida, Hiroaki Shintake, Ryutaro Tomita, Akihito Kasai, Masashi Ogasawara 1 , Yukinori Sugano 1 , Kanako Itagaki, Akira Ojima, Takeshi Machida, Hideharu Sekine, Tetsuju Sekiryu
  • Journal Title: Sci Rep Volume: 11 Pages: －
  • DOI: 10.1038/s41598-021-87340-6
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] MASP-3の活性化におけるレクチン経路の認識分子の役割 (2021)
  • Author(s): 草刈 浩平、石田 由美、大森 智子、鈴木 俊幸、関亦 正幸、町田 豪、関根 英治
  • Organizer: 日本補体学会
• [Presentation] The significance of complex formation of MASP-3 with pattern recognition molecules of the lectin complement pathway in the long-term retention of MASP-3 in the circulation (2021)
  • Author(s): Takeshi Machida, Kohei Kusakari, Yumi Ishida, Tomoko Omori, Toshiyuki Suzuki, Masayuki Sekimata, Teizo Fujita, and Hideharu Sekine
  • Organizer: 28th International Complement Virtual Workshop
  • Int'l Joint Research