2021 Fiscal Year Final Research Report

Analysis for the intestinal enteric nervous system of Hirschsprung disease patients by the novel intravital fluorescent observation method

Research Project

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Project/Area Number	19K09091
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Multi-year Fund
Section	一般
Review Section	Basic Section 55010:General surgery and pediatric surgery-related
Research Institution	Mie University
Principal Investigator	Uchida Keiichi 三重大学, 医学系研究科, リサーチアソシエイト (30293781)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	小池勇樹三重大学, 医学部附属病院, 講師 (10555551) 井上幹大三重大学, 医学系研究科, リサーチアソシエイト (30422835) 松下航平三重大学, 医学部附属病院, 助教 (70750777) 溝口明三重大学, 医学系研究科, 産学官連携講座教授 (90181916) 楠正人三重大学, 医学系研究科, 寄附講座大学教員 (50192026)
Project Period (FY)	2019-04-01 – 2022-03-31
Keywords	ヒルシュスプルング病 / 二光子レーザー顕微鏡 / 腸管神経叢 / 外科手術
Outline of Final Research Achievements	We investigated the possibility of observing the enteric nervous system (ENS) using two-photon laser scanning microscopy (TPLSM) in allied disorder of Hirschsprung disease patient. The colonic tissue (between transverse and rectum) just after operational resection was quickly dyed by curcumin. After 5 minutes’ curcumin vital staining, intestinal wall scan from serosal side was performed by TPLSM without opening the intestinal wall. Visualization of the myenteric plexus without opening the intestinal wall was performed successfully in human colonic tissue. At oral edge of the resected specimen, the size of myenteric plexus and its neural network were normal. On the other hand, from oral edge to anal edge, the myenteric plexus size was shrunk gradually and the neural network were decreased by degrees. Furthermore, at anal edge of the observational area, there was only hypoplastic shrunk myenteric plexus without neural network to other plexus.
Free Research Field	小児外科
Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements	ヒルシュスプルング病の手術においては、これまで手術中に大腸の一部を切除して、迅速病理検査を行い切除部位を決定しているため、繰り返すこともあり手術時間が長くかかり、また、腸管神経叢の分布も個々の症例で不均一なことがあり、手術成績、すなわち、術後の排便機能低下にも影響していた。本法は、大腸の外側から、腸管壁内の腸管神経叢に関しての存在有無だけでなく、神経ネットワークの低形成の程度まで観察できるため、今後のデバイスの発展などにより、切除前に至適な切除ラインの判断ができる可能性があると思われた。これは、術後の患児において、排便機能の改善だけでなくQOLの改善にも大きく寄与するものと思われる。