2020 Fiscal Year Research-status Report
膵癌の癌幹細胞特異的糖鎖による早期診断法と新規治療法の開発
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19K09207
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| Research Institution | Tokyo Metropolitan Geriatric Hospital and Institute of Gerontology |
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Principal Investigator |
石渡 俊行 地方独立行政法人東京都健康長寿医療センター(東京都健康長寿医療センター研究所), 東京都健康長寿医療センター研究所, 研究部長 (90203041)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐々木 紀彦 地方独立行政法人東京都健康長寿医療センター(東京都健康長寿医療センター研究所), 東京都健康長寿医療センター研究所, 研究員 (80639063)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 癌幹細胞 / 膵癌 / 糖鎖 / Nestin / SNP |
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| Outline of Annual Research Achievements |
膵癌に高発現する癌幹細胞マーカーは、 CD133, CD24, CD44, CXCR4, EpCAM, ABCG2, c-Met, ALDH-1, nestinなどが報告されている。Nestinは中間径フィラメントの一種で、膵癌の癌幹細胞性や増殖、転移に関与することが知られている。抗がん剤の投与とともに、nestinを抑制することで、相乗的な膵癌細胞の殺細胞効果がみられることも明らかとなっている。膵癌の癌幹細胞マーカーの中でnestinは、膵癌の有望な早期診断や新規治療法の新たな標的として期待されている。しかし、nestinは細胞内骨格タンパクの中間径フィラメントの一種のため、細胞膜表面ではなく主に細胞質内に存在しており早期診断法や新規治療法の開発は困難で、現在まで臨床応用には繋がっていない。本研究は、nestin陽性の膵癌幹細胞に特異的に発現する細胞表面の糖鎖を探索し、早期診断や治療の標的としての可能性を検討するものである。このため、生存したままの状態でnestin陽性の膵癌の癌細胞を同定、分離することを目的に研究を進めている。すでに報告されている、nestinのプロモーター領域および、2nd intronの配列を組み込んだレポーターベクターを作成した。これらのnestinの転写制御領域を組み込んだEGFP発現レポーターベクターをヒト膵癌培養細胞に遺伝子導入した。セルソーターを用いてEGFPの発現に基づいて、nestin陽性の膵癌培養細胞の分離を行なっている。さらに、近年のnestinのSNPが日本人の膵癌の発症に関連しているとの報告に基づき、変異ベクターを作成した。膵癌培養細胞株にこれらの変異ベクターとwild typeのnestin発現ベクターを遺伝子導入して比較することで、nestinのSNPの役割について検討している。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
Nestinのプロモーター領域を組み込んだEGFP発現レポーターベクターをヒト膵癌細胞に導入し、nestinのレポーター細胞を樹立し、セルソーターを用いてEGFPの発現に基づいてnestin陽性膵癌細胞の分離を行なってきた。分離したEGFP発現膵癌細胞を長期に培養を続けるとnestinの発現量が低下してくることから、nestinのもう一つの転写調節領域とされる2nd intron領域を組み込んだEGFP発現レポーターベクターについても同様の検討を行っている。さらに、膵癌の発症に関連することが報告されたnestinのSNPの役割についても、変異ベクターを作成して遺伝子導入し検討中である。
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| Strategy for Future Research Activity |
Nestin陽性膵癌細胞を分離するためnestinのレポーターベクターを用いているが、異なったプロモーター領域やエンハンサー領域などによる発現制御の可能性についても検討を進める予定である。また、近年、nestinのSNPが膵癌の発生に関与しているという報告がみられており、変異ベクターの遺伝子導入によりnestinのSNPの生物学的な意義についても検討する予定である。
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| Causes of Carryover |
実験は予定通りに概ね進んでいる。実験にかかる物品費が予定よりも少なく済んだことから次年度使用額が発生した。次年度は遺伝子導入した膵癌細胞について検討する予定である。次年度使用額はこれらの実験において使用する予定である。
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Research Products
(7 results)
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[Journal Article] FGFR4 inhibitor BLU9931 attenuates pancreatic cancer cell proliferation and invasion while inducing senescence: Evidence for senolytic therapy potential in pancreatic cancer2021
Author(s)
Sasaki Norihiko, Gomi Fujiya, Yoshimura Hisashi, Yamamoto Masami, Matsuda Yoko, Michishita Masaki, Hatakeyama Hitoshi, Kawano Yoichi, Toyoda Masashi, Korc Murray, Ishiwata Toshiyuki
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Journal Title
Cancers
Volume: 12
Pages: 2976
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
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