2021 Fiscal Year Annual Research Report

Development of new combined cancer immunotherapy for malignant soft tissue tumor

Research Project

Project/Area Number	19K09551
Research Institution	Okayama University
Principal Investigator	中田英二岡山大学, 医歯薬学域, 講師 (10649304)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	宝田剛志岡山大学, 医歯薬学域, 教授 (30377428) 尾崎敏文岡山大学, 医歯薬学域, 教授 (40294459) 山田大祐岡山大学, 医歯薬学域, 助教 (50733680) 伊藤達男川崎医科大学, 医学部, 教授 (80789123) 上甲良二岡山大学, 大学病院, 医員 (80847856) [Withdrawn]
Project Period (FY)	2019-04-01 – 2022-03-31
Keywords	悪性骨・軟部腫瘍 / 肺転移 / 増殖 / PRRX1
Outline of Annual Research Achievements	最近、間葉系幹細胞(mesenchymal stem cell: MSC)に発現するPaired related homeobox 1 (PRRX1) という遺伝子が転移に関与すると報告されている。我々はPRRX1が、間葉系幹細胞由来である骨・軟部肉腫の増殖・転移に強く影響している可能性を考えた。そこで、我々はPRRX1がMSC由来の骨肉腫にも発現していることを免疫染色で確認した。骨肉腫の肺転移や再発例では腫瘍細胞の核にPRRX1の発現を強く認めた。一方、再発・転移を認めない症例はほぼ全例陰性であった。PRRX1の発現が強い症例は有意に予後不良であった。さらに、shPRRX1を挿入したレンチウイルスを用い、高肺転移株である骨肉腫細胞株 (143B)でPRRX1をノックダウンし、WST-8 assayで増殖能を計測すると、増殖が強く抑制されることをin vitroで確認した。また、この細胞をマウスに移植すると、コントロール群に比べ増殖が抑制されることを確認した。また、PRRX1をノックダウンさせた骨肉腫細胞 (143B)を wound healing assayおよび migration assay で検討すると、いずれもコントロール群に比べ浸潤する細胞数が減少していた。さらに、PRRX1をノックダウンさせた骨肉腫細胞 (143B)をマウスの皮下に移植し、6週後にマウスの肺を取り出し肺転移数やサイズをコントロール群と比較した。すると、PRRX1をノックダウンさせた骨肉腫細胞群の方が、コントロール群と比べ、肺転移巣の数が少ないことが判明した。これらの結果からPRRX1が骨肉腫の腫瘍細胞の増殖だけでなく、移動能・浸潤能に強く影響していることが明らかとなった。したがって、PRRX1は骨肉腫において、増殖および肺転移を促進している可能性を考えた。