2019 Fiscal Year Research-status Report
microRNA発現からみた脂肪細胞の前立腺癌細胞への作用解析とその臨床応用
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19K09708
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| Research Institution | Mie University |
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Principal Investigator |
渡邉 昌俊 三重大学, 医学系研究科, 教授 (90273383)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
上村 博司 横浜市立大学, 附属市民総合医療センター, 准教授 (50244439)
石井 健一朗 三重大学, 医学系研究科, 助教 (90397513)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 前立腺癌 / 脂肪細胞 / マイクロRNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
前立腺癌は、癌細胞の特性だけでなく、腫瘍微小環境との相互作用で癌細胞の進展やホルモン治療に対する抵抗性（去勢抵抗性）や化学療法や放射線治療に対する抵抗性を獲得すると考えられている。その腫瘍微小環境は、癌細胞以外に脂肪細胞、線維芽細胞、免疫細胞、血管、細胞外マトリックスなどから構成される。この腫瘍微小環境で、癌細胞でのmicroRNA発現制御およびエクソソーム（細胞外に分泌される小胞）を介した細胞間のコミュニケーションが新たに注目されている。本研究では、前立腺癌細胞と脂肪細胞の相互作用に着目し、前立腺癌の腫瘍微小環境を模したin vitro培養系で、脂肪細胞により誘導される前立腺癌細胞のmicroRNAおよび細胞外小胞内のmicroRNA発現解析および機能的解析を行う。脂肪細胞により前立腺癌細胞内で発現が誘導され、細胞間コミニケーションに利用されるmicroRNAの前立腺癌の進展・治療抵抗性への関与の解明し、診断・治療への可能性を探る。
今年度は、前立腺癌の腫瘍微小環境を仮定した共培養系（CM:conditioned medium）のもとで、脂肪細胞/癌関連脂肪細胞による前立腺癌細胞の細胞挙動の変化（細胞増殖、移動能、浸潤能など）、前立腺癌細胞のmicroRNA発現を網羅的に解析し、主要なmicroRNAを抽出した。前実験より得られていたCMでの培養では、明らかに前立腺癌細胞の増殖が更新していることを再確認した。microRNAの網羅的発現解析では、235から289個のmicroRNAを抽出し、さらに、8通りの発現比でLog2値が1以上または-1以下のmiRNAをピックアップしたところ65個があがり、最終的にhsa-miR-629-3pなど上位10個の発現比が大きいものを候補microRNAとして決定した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
CMによる前立腺癌細胞株培養における前実験では、十分なmicroRNAの変動を確認することができなかったが、今回はCMの質など注意しながら培養を行い、仮説通りの結果が得られた。
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| Strategy for Future Research Activity |
microRNAの網羅的発現解析では、235から289個のmicroRNAを抽出し、さらに、8通りの発現比でLog2値が1以上または-1以下のmiRNAをピックアップしたところ65個があがり、最終的にhsa-miR-629-3pなど上位10個の発現比が大きいものを候補microRNAとして決定した。網羅的発現解析から、ここの細胞株の質的解析及び機能解析に取り掛かる。
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| Causes of Carryover |
臨床研究及び該当する検体の収集、取り扱いについて、当初の想定より遅れが生じたために必要な消耗品を購入するに至らなかったため。次年度において、遅延した臨床研究への橋渡し及び検体収集および処理、解析に確実に使用する。
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