2019 Fiscal Year Research-status Report
子宮Ecosystemの観点から捉える子宮体がんに対する抗腫瘍免疫応答
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19K09778
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| Research Institution | Aichi Cancer Center Research Institute |
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Principal Investigator |
鈴木 史朗 愛知県がんセンター(研究所), 腫瘍免疫応答研究分野, 研究員 (20612758)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 腫瘍免疫 / 子宮体がん |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では、Ⅰ）子宮体がん内部位別の抗腫瘍免疫応答子宮体がんとⅡ）子宮内細菌叢の関連性という２課題を解明すべく臨床検体・臨床情報を用いて研究を行っている。
研究開始から２０２０年３月末までに名古屋大学医学部附属病院で手術が施行された子宮体がん２１例から、患者同意取得のもと検体採取を行った。①腫瘍浸潤リンパ球および抹消血単核細胞の回収、②腫瘍組織からDNAおよびRNAの回収、③便・腟分泌物・子宮内分泌物由来のDNA抽出を、各症例毎に可能な項目について検体採取した。
①で得られた検体を用いて、FACS解析（１２色の同時染色：live/dead、CD3、CD4、CD8、CCR7、CD45RA、Foxp3、PD-1、CTLA4、TIM3、LAG3、TIGIT）を行った。子宮体がん患者末梢血中のCD4陽性T細胞におけるeffector Treg（CD45RA-Foxp3high）比率は0.1-1.3%（健常人ボランティア血中での比率は約1.25%）であった。子宮体部の腫瘍内と子宮筋層-腫瘍浸潤境界域の筋層内という採取する局在別の比較では腫瘍内の方がeTreg比率が高い傾向にあったが、境界域筋層側であってもeTregが腫瘍内と同程度かむしろ逆に高い割合で存在している症例も確認された。CD8陽性T細胞中のPD-1発現が高い症例では、CCR7-CD45RA-であるエフェクターメモリー分画の割合が高い傾向がみられた。
③に関しては子宮内分泌物検体から抽出できたDNA量が推定よりも少なく、細菌叢解析を行うには不十分な症例が多かったことから、採取方法や抽出方法の再検討・改善を要する状況である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
本研究では、Ⅰ）子宮体がん内部位別の抗腫瘍免疫応答子宮体がんとⅡ）子宮内細菌叢の関連性について解明すべく研究を行っているため、進捗に影響を与える大きな因子として臨床検体の収集が挙げられる。検体数は対象症例の手術数や同意取得率にも左右されるため、開始できる研究内容にバラつきが生じている。
研究協力いただいた症例の検体から、①腫瘍浸潤リンパ球および抹消血単核細胞の回収、②腫瘍組織からDNAおよびRNAの回収、③便・腟分泌物・子宮内分泌物由来のDNA抽出を症例毎に収集しているが、①や②に関しては他の研究プロジェクトでの経験があることから滞りなく遂行できている。一方、③に関しては、便・腟分泌物検体と比較して同様な検体採取のみでは子宮内分泌物検体から抽出できるDNA量が不十分な症例が多いことが明らかとなった。そのため、今後子宮内分泌物・便・腟分泌物検体セットでの細菌叢解析を行うためには、子宮内分泌物に関しては採取方法や抽出方法の再検討を要する状況である。
①で得られた子宮体がん症例18例の検体については、微生物・免疫学講座分子細胞免疫学/免疫細胞動態学教室内研究室の協力のもと、FACS解析（12色の同時染色：live/dead,CD3,CD4,CD8,CCR7,CD45RA,Foxp3,PD-1,CTLA4,TIM3,LAG3,TIGIT）を行えている。
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| Strategy for Future Research Activity |
引き続き検体の収集およびそれらを用いた研究を行っていく必要があるが、研究代表者の異動があったことから体制の再構築が必要である。名古屋大学大学院医学系研究科と愛知県がんセンターは連携・協力を推進するための基本協定が2018年度には締結されていることから、今年度からは名古屋大学だけでなく愛知県がんセンターの症例に関しても追加して研究対象とできるような各種手続きを進めていく予定である。
2019年度までに収集がなされた検体に関しては、愛知県がんセンターおよび名古屋大学医学部の両施設にいる研究協力者のサポートを得ながら順次、腫瘍浸潤リンパ球および抹消血単核細胞を用いたFACSによる免疫担当細胞サブセット解析や腫瘍組織から回収したDNAおよびRNAを用いたがん関連遺伝子発現解析/遺伝子変異解析を進めていく。
また、子宮体がんの筋層浸潤先進部～傍腫瘍領域におけるリンパ組織様構造に着目した病理組織学的・免疫組織化学的解析についても2020年度以降は研究を行っていく予定である。
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Research Products
(3 results)
