2020 Fiscal Year Research-status Report
根面う蝕研究のための新規 ex vivo バイオフィルムモデルの開発
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19K10107
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
前薗 葉月 大阪大学, 歯学研究科, 助教 (00613390)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
野杁 由一郎 新潟大学, 医歯学系, 教授 (50218286)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | バイオフィルム |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究では，超高齢社会を迎え深刻な問題となっている根面う蝕の抑制・制御を最終目標とし，そのために必要な根面う蝕の病態を反映した実際のヒト口腔内サンプルを用いた根面う蝕 ex vivo バイオフィルムモデルを構築することを目的とする。まず健常者と根面う蝕発症者の口腔内の違いについて調査し，それをもとに根面う蝕を再現する ex vivo バイオフィルムモデルを構築する計画で研究を進めている。
大阪大学歯学部附属病院を受診した65 歳以上の患者で根面う蝕を有する者で，インフォームドコンセントを行い同意が得られた者を対象とし、また、歯冠部および歯根面にう蝕のないものを健常者群とし、滅菌されたプラスチックチューブに1分間で得られる非刺激時唾液、および根面う蝕のう窩を覆うバイオフィルムサンプルを滅菌器具を用いて採取した。健常者から得るコントロールサンプルについても同様に唾液および歯頚部のバイオフィルムサンプルを採取した。その後、Powersoil DNA Isolation Kit を用いて細菌由来の DNA を抽出し，ピロシーケンス法を用いた細菌叢のメタゲノム解析（外注）のためのサンプル調整を
行った。
根面う蝕 ex vivo バイオフィルムモデルの構築のため、被験者から採取したう窩および歯頚部を覆うバイオフィルムを縣濁した溶液を用意し、滅菌したハイドロキシアパタイトディスクを溶液中で培養することによりハイドロキシアパタイト上に実験的に ex vivo バイオフィルムを作製し、生菌数測定を行った。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
COVID-19の影響により、診療自粛期間および研究活動自粛期間があったため、全体的に進行が遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
根面う蝕患者の非刺激時唾液およびう窩のバイオフィルムサンプルを引き続き採取し、臨床サンプルの解析を継続する。また、実験的に作製した ex vivo バイオフィルムの解析を行うとともに、準備を進めてきた2021年度遂行予定である ex vivo バイオフィルムに対する抗バイオフィルム効果が期待できる薬剤の効果に関する解析を行う予定である。
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| Causes of Carryover |
コロナウイルスによる診療停止期間および研究活動停止期間の影響を受け、研究活動に遅れが生じたために次年度使用額が生じた。次年度に研究活動の遅れを取り戻すべくサンプル採取を積極的に進めていき、実験を精力的に進める。生じた次年度使用額は昨年度遂行できなかった ex vivo バイオフィルムの細菌叢解析に使用する予定である。
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