脂質代謝を標的とした新規免疫抑制解除型治療の基盤研究

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19K16836
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 國定 勇希 岡山大学, 医歯薬学総合研究科, 助教 (10779416)
• Project Period (FY): 2019-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 制御性T細胞（Treg） / 代謝 / がん免疫 / 脂肪酸合成阻害剤

Outline of Annual Research Achievements

1. 蛍光免疫組織染色によるstage毎のがん細胞における脂肪酸合成と免疫細胞の相関関係の解析では口腔がん患者の組織切片で脂肪酸合成剤FASN(Fatty acid synthase)分子，Treg, CD8T細胞，CD4T細胞などの免疫細胞を多重蛍光免疫組織染色し，現在も症例数を増やして継続して解析中である．同実験では，腫瘍組織内に浸潤しているTregやCD8を可視化して，また同時に脂肪酸合成阻害剤との関連も検出出来ている．
2. 脂肪酸合成阻害剤の直接的ながん細胞への作用の解析では脂肪酸合成阻害剤(スタチン)の存在下，非存在下で，ヒト口腔がん細胞株(SAS，HSC2,3)やマウスがん細胞株(SCC7)を培養し，脂肪酸合成阻害が直接的にが ん細胞の増殖能や浸潤能に影響するかどうかをin vitroの培養系で解析を行っている.がん細胞をシャーレで培養し，数の変化を経時的に観察し，増殖能の評価 を行い，transwell invasion assayを用いて浸潤能の評価を行っている.さらに，脂肪酸合成阻害剤(スタチン)の濃度を振り，マウスがん細胞株(SCC7)を培養し，フローサイトメーターを用いて細胞周期に変化があるかどうかの解析を行っている．
3. マウス腫瘍移植モデルを用いた脂肪酸合成阻害剤による末梢あるいは腫瘍局所におけ るTregの数の変化，機能の変化の解析ではマウスがん細胞株をC57BL/6マウス背部皮内に移植し，脂肪酸合成阻害剤を使用して抗腫瘍効果があるか解析を試みた．

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

1. 蛍光免疫組織染色によるstage毎のがん細胞における脂肪酸合成と免疫細胞の相関関係の解析では，順調に症例数を増やしつつ，解析を行っている．
2．脂肪酸合成阻害剤の直接的ながん細胞への作用の解析では，がん細胞株，使用する脂肪酸合成阻害剤により，作用・増殖能への影響がやや異なる結果が出ているため，総合的に判断が必要であり，解析を行っている．
3. マウス腫瘍移植モデルを用いた脂肪酸合成阻害剤による末梢あるいは腫瘍局所におけ るTregの数の変化，機能の変化の解析では，マウス口腔扁平上皮がん細胞株（SCC7）をC57BL/6マウスへの移植を行ったが，自然拒絶が生じたため，C3Hマウスへの移植を再度検討し直している状況である．手技に関しては，問題は生じていない．

Strategy for Future Research Activity

1. 蛍光免疫組織染色によるstage毎のがん細胞における脂肪酸合成と免疫細胞の相関関係の解析では，このまま症例数を増やし，解析を継続して行う．
2．脂肪酸合成阻害剤の直接的ながん細胞への作用の解析では，がん細胞株と使用する脂肪酸合成阻害剤を見直す必要がある．網羅的に解析を行い，適切な条件を検討する．
3. マウス腫瘍移植モデルを用いた脂肪酸合成阻害剤による末梢あるいは腫瘍局所におけ るTregの数の変化，機能の変化の解析では，C3Hマウスで同様の実験を行い，解析を行う．
4. マウス腫瘍移植モデルを用いた脂肪酸合成阻害剤と抗がん剤・免疫療法の併用による 抗腫瘍効果の判定，免疫細胞の増減，機能変化の解析では，脂肪酸合成阻害剤と口腔がんで使用されている既存の抗がん剤，分子標的薬，免疫療法の併用を行い，抗腫瘍効果の増強等を解析を行う予定である．