2019 Fiscal Year Research-status Report
Development of a new postoperative recurrence control method for hepatocellular carcinoma targeting intestinal flora
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19K18137
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
島田 慎吾 北海道大学, 医学研究院, 特任助教 (40755576)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 脂肪肝 / 虚血再灌流障害 / 肝癌細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
【方法】1)脂肪肝ラットの70％の部分温虚血、再灌流モデルを作成し、虚血時間を45, 75分とした。虚血終了時、再灌流後1, 6時間に肝臓、血液を採取した。2) ラット70％肝切除モデルを確立した。3)肝癌細胞株を用いて、脂肪変性や虚血再灌流に伴うストレスが、微小環境の変化を介して肝細胞がんの増殖、転移に与える影響をin vitroで検討した。
【結果】1) 血中ALT, AST、傷害(病理)スコアは再灌流6時間までにピーク値をとり、虚血時間依存的に、また、脂肪肝でより強く傷害された。これらの評価では虚血終了時に虚血時間依存した群間差を認めず、術後早期の肝機能障害、肝転移促進要因、肝再生不良等の予測は困難であった。肝組織切片をイメージング質量分析(MS)法で解析すると、陰イオンモード、m/z 200～1500 の範囲で検出された200以上のピークのうち、虚血時間の相異、あるいは、脂肪肝の有無で比較し、虚血終了時に有意な違いを認めた物質の推移を検討した。これらの物質は、虚血中に増減し、再灌流後にさらに変化が増強する、あるいは、正常肝の値に復する、等の幾つかの推移を呈した。側鎖構成が異なる数種のLysophosphatidylinositol（LPI）が虚血時間依存的に虚血中に蓄積し、肝Zone1に蓄積していた。これらの変化は脂肪肝で増強され、Pringle法併用肝切除における、innate immunity増強、癌細胞の接着、浸潤に影響を与える可能性が見出された。 2) ラット70％肝切除、3) 肝癌細胞株の脂肪酸 (オレイン酸、パルミチン酸) 添加培養等のモデル作成に着手し、概ね安定した。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
血液や肝組織の解析に想定以上に時間を要したため、現在までに腸内細菌叢の解析にたどり着けていない。
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| Strategy for Future Research Activity |
当初の計画通りの内容を進めていく予定である。全ての実験は、厳密にモデルを安定化したうえで試料採取することで、最小限の解析数で現象を説明できるデータを得る。
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| Causes of Carryover |
【理由】H31年(令和元年)度は基礎的検討が予想よりも難渋し、各種解析用の試料採取に至らず、解析費用が少額だったため。
【使用計画】動物モデルからの試料採取、各種解析を進める。今年度に解析を予定していた分も含め、相応の経費執行が見込まれる。
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