2020 Fiscal Year Research-status Report
生物学的製剤は脊柱靱帯骨化症の治療薬となり得るか？
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19K18413
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| Research Institution | Hirosaki University |
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Principal Investigator |
浅利 享 弘前大学, 医学部附属病院, 助教 (40529674)
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| Project Period (FY) |
2019-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | 間葉系幹細胞 / 脊柱靱帯骨化症 / 生物学的製剤 / 骨分化 / 創薬 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
【今年度の研究手法】脊柱靱帯骨化症患者と非患者で手術を受ける患者より、手術時に切除され本来破棄される脊柱靱帯を約1～2g採取して間葉系幹細胞（MSC）を単離した。MSCを骨化誘導培地で培養し、骨化誘導を行った。この際に、骨化誘導培地にTNF-α阻害薬を添加する群も作製した。21日間培養後にRNeasy Mini Kitを使用しtotal RNAを抽出後に、Real-time PCRにて骨関連遺伝子 (collagen type 1, osteocaicin, BMP-2) の発現を解析した。またAlizarin Red 染色による骨分化能の評価を行い、炎症性サイトカイン阻害薬投与群と非投与群で比較検討した。
【結果】骨化誘導を行うことで脊柱靱帯骨化症患者由来MSCは、非患者に比較し、Real-time PCRでは骨化関連遺伝子の高い発現を認め、Alizarin Red染色においても染色が有意に強かった。炎症性サイトカイン阻害薬（TNF-α阻害薬）投与群では、統計学的有意差はないものの、投与群で骨分化を抑制できた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
現在当初の予定通り、脊柱靱帯骨化症患者の脊柱靱帯由来間葉系幹細胞（MSC）に炎症性サイトカイン阻害薬（TNF-α阻害薬）投与し、骨分化が抑制できることが確認できている。
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| Strategy for Future Research Activity |
引き続き、実験に用いるサンプル数を増やし解析を行う方針としたい。
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| Causes of Carryover |
新型コロナウイルス感染症により、学会出張ができずに未使用金が出たものの、翌年以降に実験試薬の購入と、学会参加のため使用する計画となっている。
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[Journal Article] Effect of teriparatide on ligamentum flavum mesenchymal stem cells isolated from patients with ossification of the posterior longitudinal ligament2021
Author(s)
Araki R, Asari T, Kudo H, Sasaki E, Yamauchi R, Liu X, Wada K, Kumagai G, Sasaki A, Furukawa KI, Ishibashi Y.
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Journal Title
J Pharmacol Sci.
Volume: 145
Pages: 23-28
DOI
Peer Reviewed
