Studies on development of control strategy for Asian zoonotic schistosomiasis with microsatellite marker system

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 19KK0173
• Research Institution: Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
• Principal Investigator: 河津 信一郎 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 教授 (60312295)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 尾針 由真 酪農学園大学, 獣医学群, 助教 (00847056) ; 桐木 雅史 獨協医科大学, 医学部, 講師 (50265302)
• Project Period (FY): 2019-10-07 – 2024-03-31
• Keywords: 顧みられない熱帯病 / 人獣共通感染症 / 日本住血吸虫症 / スイギュウ / マイクロサテライトマーカー

Outline of Annual Research Achievements

研究4年目（2022年度）に、調査地をLeyte州Tacloban市、近郊の集落7カ所として、住民及びスイギュウからの糞便と血清の採取を行った。住民（合計101名）からの採材は地域保健所の協力を得て行った。また、スイギュウ（合計24頭）からの採材は農業省の地域事務所の協力を得て行った。Kato-Katz法での虫卵検査の結果、2カ所の集落（Gacao及びSta. Mesa）の住民、それぞれ、8名及び4名（合計12名）が日本住血吸虫症陽性と診断された。また、2カ所の集落（Maliwaliw及びSan Isidro）で飼育されていたスイギュウ、それぞれ、1頭（合計2頭）が日本住血吸虫症陽性と診断された。患者及び患畜あたり1-62個の虫卵を70%エタノールあるいはDNA sheildに保存して日本に持ち帰り、単一寄生虫卵からのDNAサンプルの調整を行った。現在、これらDNAサンプルについて、マイクロサテライト（STR）マーカーによる多座位の遺伝子型（multi-locus genotype: MLG）解析を進めている。また、昨年度開発したメコン住血吸虫のチオレドキシンペルオキシダーゼ-1組換体タンパク質（rSmTPx-1）を抗原に用いるELISA（rSmTPx-1 ELISA）の性能を、Kato-Katz法で住血吸虫症陽性と診断されたカンボジア人患者血清28検体とラオス人に患者血清30検体（合計58検体）及び陰性と診断されたカンボジア人血清30検体とラオス人血清30検体（合計60検体）で評価したところ、感度84.5%及び特異性93.3%の好成績が得られた。一方、rSmTPx-1 ELISAはタイ肝吸虫症の患者血清とも交差反応を示すことから、組換体抗原の改良が必要になることも同時に示唆された。組換体抗原を用いるELISAは、抗原の大量供給と品質管理が容易なことから、大規模調査への応用が期待できる。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

日本側チームの渡航はもとよりフィリピン側チームの国内移動も制限さていたため、昨年度の一回のみしか現地での材料採取（現地調査）に着手できていない。また、昨年度調査では、保虫宿主としてスイギュウと同じく重要なイヌからの採材が出来ていない。また、当該調査で採取した材料についても解析を継続中で、結果をまとめることが出来ていない。

Strategy for Future Research Activity

前年度に採取した材料について解析結果をまとめる。また、フィリピン側カウンターパートとの事前協議の内容を受けて、延長が承認されている研究5年目(2023年度)にも、日本住血吸虫症”高度”流行地であるLeyte州での材料採取を再度行い、患者、スイギュウ及びイヌを対象に調査研究をおこなう。長崎大学熱帯医学研究所寄生虫学分野濱野真二郎教授に、現地調査に研究協力者として参加していただき、アフリカでの住血吸虫症流行の疫学およびその対策との比較とそれに立脚した情報の提供を依頼する。

Causes of Carryover

現地での材料採取を一回しか行えなかったため。研究の延長が承認されている次年度に、フィリピン日本住血吸虫症”高度”流行地での現地調査を再度行う。

Research Products

• [Int'l Joint Research] フィリピン大学マニラ校/フィリピンカラバオセンター/WHO西太平洋地域事務局(WPRO)(フィリピン)
  • Country Name: PHILIPPINES
  • Counterpart Institution: フィリピン大学マニラ校/フィリピンカラバオセンター/WHO西太平洋地域事務局(WPRO)
• [Int'l Joint Research] カンボジア保健省国立マラリア センター(カンボジア)
  • Country Name: CAMBODIA
  • Counterpart Institution: カンボジア保健省国立マラリア センター
• [Int'l Joint Research] ラオス熱帯医学公衆衛生研究所(ラオス)
  • Country Name: LAOS
  • Counterpart Institution: ラオス熱帯医学公衆衛生研究所
• [Int'l Joint Research] WHO東南アジア地域事務局(SEARO)(インド)
  • Country Name: INDIA
  • Counterpart Institution: WHO東南アジア地域事務局(SEARO)
• [Journal Article] Cloning, expression and evaluation of thioredoxin peroxidase-1 antigen for the serological diagnosis of Schistosoma mekongi human infection. (2023)
  • Author(s): Wanlop, A., Angeles, JMM., Macalanda, AMC., Kirinoki, M., Ohari, Y., Yajima, A., Yamagishi, J., Ona, KAL., and Kawazu, S.
  • Journal Title: Diagnostics (Basel) Volume: 12(12) Pages: 3077
  • DOI: 10.3390/diagnostics12123077.
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Evaluation of crude and recombinant antigens of Schistosoma japonicum for the detection of Schistosoma mekongi human infection. (2023)
  • Author(s): Angeles, JMM., Wanlop, A., Dang-Trinh MA., Kirinoki, M., Kawazu, S., and Yajima, A.
  • Journal Title: Diagnostics (Basel) Volume: 13(2) Pages: 184
  • DOI: 10.3390/diagnostics13020184
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Serological evaluation of the schistosome’s secretory enzyme phytochelatin synthase and phosphoglycerate mutase for the detection of human Schistosoma japonicum infection. (2022)
  • Author(s): Angeles, JMM., Goto, Y., Dang-Trinh MA., Rivera, PT., Villacorte, EA., and Kawazu, S.
  • Journal Title: Parasitol. Res. Volume: 121(8) Pages: 2445-2448
  • DOI: 10.1007/s00436-022-07568-7.
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] A simple and efficient miracidium hatching technique for preparing a single-genome DNA sample of Schistosoma japonicum. (2022)
  • Author(s): Wanlop, A., Dang-Trinh, MA., Kirinoki, M., Suguta, S., Shinozaki, K., and Kawazu, S.
  • Journal Title: J. Vet. Med. Sci. Volume: 84(8) Pages: 1108-1110
  • DOI: 10.1292/jvms.21-0536.
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Presentation] Schistosoma mekongi TPx-1 as ELISA antigen for diagnosis of Asian schistosomiasis. (2023)
  • Author(s): Wanlop A., Angeles JMA., Kirinoki M., Dang TMA., Ohari, Y., Yamagishi J., Yajima A., and Kawazu S.
  • Organizer: 2023年日米医学合同EID会議 寄生虫疾患部会パネル会議 Manila, Philippines（シンポジウム 口頭発表
  • Int'l Joint Research / Invited
• [Presentation] Diagnostic performance of recombinant antigen thioredoxin peroxidase-1 (TPx-1) in detection of Schistosoma mekongi infection. (2023)
  • Author(s): Wanlop A., Angeles JMA., Kirinoki M., Dang, TMA., Ohari Y., Yagagishi J., Yajima A., and Kawazu S.
  • Organizer: 第92回日本寄生虫学会大会 金沢市（口演発表）
• [Presentation] Diagnostic potential of Schistosoma japonicum recombinant antigens with ELISA in detecting S. mekongi human infection in Laos. (2022)
  • Author(s): Wanlop A., Angeles JMA., Kirinoki M., Dang, TMA., Yajima A., and Kawazu S.
  • Organizer: 第91回日本寄生虫学会大会 帯広市（ポスター発表）
• [Presentation] Expression and evaluation of recombinant antigen thioredoxin peroxidase-1 (TPx-1) from Schistosoma mekongi for schistosomiasis diagnosis. (2022)
  • Author(s): Wanlop A., Angeles JMA., Kirinoki M., Dang, TMA., Yajima A., and Kawazu S.
  • Organizer: 2022国際熱帯医学・マラリア会議（ICTM2022）Bangkok, Thailand（口頭発表）
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] The expression profile analysis of transient receptor potential (TRP) channel, the possible target of praziquantel in Schistosoma japonicum. (2022)
  • Author(s): Shinozaki K., Kirinoki M., Wanlop A., Watanabe, K., Ohari, Y., Suguta, S., Suganuma, K., Inoue, N., and Kawazu S.
  • Organizer: 2022米国熱帯医学会年会 Seattle, Washington USA（ポスター発表）
  • Int'l Joint Research
• [Remarks] 帯広畜産大学 原虫病研究センター （日本語版）
  • URL: https://www.obihiro.ac.jp/facility/protozoa/
• [Remarks] 帯広畜産大学 原虫病研究センター （英語版）
  • URL: https://www.obihiro.ac.jp/facility/protozoa/en