2010 Fiscal Year Annual Research Report
生態学的適所における造血幹細胞分裂の分子基盤の解明
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20390270
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
高倉 伸幸 大阪大学, 微生物病研究所, 教授 (80291954)
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| Keywords | 幹細胞 / 発生分化 / 自己複製 / ニッチ / 発生医学 |
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| Research Abstract |
CD34陰性の休眠中の造血幹細胞では無機能なPSFIのshort formが産生され、CD34陽性の一過性分裂期の造血幹細胞では機能的なPSF1のlong formが形成される。PSF1はDNA複製に関わる分子であることから、幹細胞の休眠期と分裂期におけるPSFIの発現制御を明らかにすることは、幹細胞性維持機構の解明につながる。本年度、PSF1遺伝子の1stエクソンから5'上流領域の5kbのプロモーター領域遺伝子をクローニングした。この5kbのPSF1プロモーター遺伝子と、GFP蛍光蛋白をコードする遺伝子を連結したコンストラクトを作製した。このモニター遺伝子をPSF1を発現するNIH3T3細胞に遺伝子導入したところ、この5kbのプロモーター領域でPSF1の発現制御解析が可能であることが判明した。次に、このプロモーター遺伝子の変異体を作製して、解析したところ、1stエクソンから1kb上流までのプロモーター領域(A領域)で十分な活性があることが判明した。一方で、4-5kb上流域には、PSF1遺伝子の発現を負に制御する領域(B領域)が存在することが判明した。A領域、B領域には細胞周期を正および負に制御することが判明している、E2Fファミリー転写因子の結合モチーフが存在しており、A領域にはE2F1-3が、B領域にはE2F4-6が結合して、PSF1遺伝子の発現を制御することが想像された。B領域におけるE2F6の結合をChlP解析で確認できたことから、まずB領域のE2F結合領域へのE2F6結合による細胞周期の負の制御機構について言及するため、NIHH3T3細胞にE2F6をノックダウンさせるRNAiを遺伝子導入を試みたが、PSF1遺伝子発現には影響を及ぼさなかった。よってE2F4以外のE2F5, 6のノックダウンおよびこれらすべてのノックダウンが必要であることが判明した。
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[Journal Article] Docking Protein Gabl Is an Essential Component of Postnatal Angiogenesis After Ischemia via HGF/c-Met Signaling.2011
Author(s)
Shioyama W, Nakaoka Y, Higuchi K, Minami T, Taniyama Y, Nishida K, Kidoya H, Sonobe T, Naito H, Arita Y, Hashimoto T, Kuroda T, Fujio Y, Shirai M, Takakura N, Morishita R, Yamauchi-Takihara K, Kodama T, Hirano T, Mochizuki N, Komuro I.
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Journal Title
Circ Res.
Volume: (In Press)
Peer Reviewed
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[Journal Article] Sphingosine 1-phosphate(S1P)regulates vascular contraction via S1P3 receptor : investigation based on a new S1P3 receptor antagonist.2010
Author(s)
Murakami A, Takasugi H, Ohnuma S, Koide Y, Sakurai A, Takeda S, Hasegawa T, Sasamori J, Konno T, Hayashi K, Watanabe Y, Mori K, Sato Y, Takahashi A, Mochizuki N, Takakura N.
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Journal Title
Mol Pharmacol.
Volume: 77
Pages: 704-713
Peer Reviewed
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[Journal Article] Up-regulation of PSF1 promotes the growth of breast cancer cells.2010
Author(s)
Nakahara I, Miyamoto M, Shibata T, Akashi-Tanaka S, Kinoshita T, Mogushi K, Oda K, Ueno M, Takakura N, Mizushima H, Tanaka H, Ohta T.
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Journal Title
Genes Cells
Volume: 15
Pages: 1015-1024
Peer Reviewed
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[Journal Article] Aliver-derived secretory protein, selenoprotein P, causes insulin resistance.2010
Author(s)
Misu H, Takamura T, Takayama H, Hayashi H, Matsuzawa-Nagata N, Kurita S, Ishikura K, Ando H, Takeshita Y, Ota T, Sakurai M, Yamashita T, Mizukoshi E, Yamashita T, Honda M, Miyamoto K, Kubota T, Kubota N, Kadowaki T, Kim HJ, Lee IK, Minokoshi Y, Saito Y, Takahashi K, Yamada Y, Takakura N, Kaneko S.
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Journal Title
Cell Metab.
Volume: 12
Pages: 483-495
Peer Reviewed
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[Journal Article] Identification and functional analysis of endothelial tipcell-enriched genes.2010
Author(s)
del Toro R, Prahst C, Mathivet T, Siegfried G, Kaminker J S, Larrivee B, Breant C, Duarte A, Takakura N, Fukamizu A, Penninger J, Eichmann A.
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Journal Title
Blood
Volume: 116
Pages: 4025-4033
Peer Reviewed
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