2010 Fiscal Year Annual Research Report
歯胚形成過程における新規膜蛋白を介した細胞内外分子相互作用の解析
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20390466
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
坂井 英隆 九州大学, 大学院・歯学研究院, 教授 (80136499)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小林 家吉 九州大学, 大学院・歯学研究院, 准教授 (40243951)
清島 保 九州大学, 大学院・歯学研究院, 講師 (20264054)
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| Keywords | 歯胚 / 発生・再生 / cDNAサブトラクション / in situ hybhdization / 免疫組織化学 / アンチセンス法 / 器官培養 / 歯原性幹細胞 |
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| Research Abstract |
本科学研究補助金により平成22年度に以下の研究成果を得た。
1.cDNAサブトラクション法により検出した、胎生12日の下顎に高発現する遺伝子、15kDa interferon alpha responsive geneおよびAdenosine triphosphate synthase subunit a(Atpase6)の歯胚における発現様式を解析し、この遺伝子が歯胚の発生やエナメル質の形成に重要な役割を果たしている可能性を示し、論文に発表した。
2.蛋白構造のモチーフから細胞膜表面の受容体と予想されProtogenin(Prtg)について構造解析を行い、この因子が現在まで歯胚の発生・発育過程では報告されていない遺伝子である事を同定し、この因子の発現抑制をすると歯胚の形成が阻害され、さらに歯胚発生に重要な因子であるBone morphogenic protein 4の発現を抑制したる事から、歯胚の発生に重要なシグナル受容体であり、歯原性幹細胞との関連が示唆された。またin situ hybridaization法による検索から,本遺伝子が神経堤由来の細胞に発現している事が解った。以上の結果について論文に発表した(highly accessed articleに選定された)。
3.thymosin beta 4(Tb4)、について、我々はすでにこの遺伝子が歯胚の発生と分化に関連している事を明らかにし、Histchemistry and Cell Biologyに発表した(124:207-213,2005)。さらにTb4がDmp-1、Dspp、amelpgenin、amelpblastinなどの歯牙形成に係わる遺伝子の発現を制御している事や、これらの遺伝子の上流にあるRunx2/Cbfa1やNucleolinの発現制御も担っている事、さらに上皮細胞の間葉への陥入に必須の基底膜の改造に関わるMatrix metaloproreinase-2/-9の発現も抑制している事を明らかにし、多元的なTb4の機能解析を行った。現在論文発表準備中である。
4.cDNAサブトラクション法により検出した、胎生10.5日の下顎に高発現する遺伝子(遺伝子Xと仮称)を扁平上皮組織由来のHaCaT細胞へ導入することにより、種々の歯原性因子を発現し、石灰化物の形成能を発揮するようになった事を明らかにし、歯原性上皮性幹細胞の作製の可能性を見いだした。現在論文作成中である。
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