新生児期の甲状腺系機能刷り込み現象の解明による発達期化学物質影響のリスク推定

2009 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 20510065
• Research Institution: Hiroshima University
• Principal Investigator: 藤本 成明 Hiroshima University, 原爆放射線医科学研究所, 准教授 (40243612)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 北村 繁幸 日本薬科大学, 薬学部, 教授 (40136057)
• Keywords: 甲状腺ホルモン応答遺伝子 / 発達期影響 / 新生児期曝露 / ブロム化難燃剤 / 甲状腺ホメオスタシス

Research Abstract

1. ラット肝臓での甲状腺ホルモン応答遺伝子同定
昨年度、cDNAマイクロアレイにより検索して得られた肝臓細胞における甲状腺ホルモン応答候補遺伝子について、発現を確認して最終的な同定をおこなった。すなわち、10週齢雄のF344ラットへ抗甲状腺剤および甲状腺ホルモンを投与し、その肝組織及び下垂体組織からRNAを抽出した。候補遺伝子について、real-time RT-PCRによりmRNA発現の定量をおこなった。新規に同定された応答遺伝子は、phosphoenolpyruvate carboxykinase 1, P2DXK, SLC17, Cyp7A1, iodothyronine type1,同type 2, SPOT3, malic enzyme 1であった。
2. 新規甲状腺ホルモン応答遺伝子のプロモーター解析
上記のphosphoenolpyruvate carboxykinase 1, P2DXK, SLC17, Cyp7A1について、その遺伝子上流域を高精度PCRにより遺伝子クローニングした。0.2～2kbpについてサブクローニングしルシフェラーゼレポーターを構築した。これをラット肝臓細胞株、下垂体細胞株に導入して、甲状腺ホルモンを投与することで、ホルモン応答性の解析をおこなった。P2DXKについては、in vitroでのホルモン応答性転写活性が証明された。この領域にはTRE類似配列が存在しておりホルモン応答性を司っていると考えられた。

Research Products

• [Journal Article] Identification of rat prostatic secreted proteins using mass spectrometric analysis and androgen-dependent mRNA expression (2009)
  • Author(s): Fujimoto N, Suzuki T, Ohta S, Kitamura S.
  • Journal Title: J Androl. 30 Pages: 669-678
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 環境中における甲状腺ホルモン撹乱物質のスクリーニング (2010)
  • Author(s): 佐能正剛, 岩瀬恵理, 松原加奈, 杉原数美, 浦丸直人, 藤本成明, 北村繁幸, 太田茂
  • Organizer: 第130回日本薬学会年会
  • Place of Presentation: 岡山市
  • Year and Date: 2010-03-30
• [Presentation] 化学物質による肝肥大の毒性指標としての性ホルモン受容体および応答性遺伝子発現の検討 (2010)
  • Author(s): 藤本成明, 吉田緑, 西川秋佳, 小澤正吾, 蒲生俊恵, 根本清光, 出川雅邦
  • Organizer: 第26回日本毒性病理学会学術集会
  • Place of Presentation: 金沢市
  • Year and Date: 2010-02-03
• [Presentation] MS解析による前立腺タンパク質の同定とそのアンドロゲン応答性 (2009)
  • Author(s): 藤本成明, 鈴木智晴, 太田茂
  • Organizer: 第32回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 横浜市
  • Year and Date: 2009-12-09
• [Presentation] 環境化学物質の甲状腺ホルモン受容体結合活性とその代謝変動 (2009)
  • Author(s): 佐能正剛, 岩瀬恵理, 杉原数美, 加藤善久, 浦丸直人, 藤本成明, 北村繁幸, 太田茂
  • Organizer: 環境ホルモン学会第12回研究発表会
  • Place of Presentation: 東京都
  • Year and Date: 2009-12-07
• [Presentation] Prostatic secreted proteins in mice and rats : Identification using mass spectrometric analysis and the hormone dependent expression (2009)
  • Author(s): Fujimoto N., Suzuki, T., Ohta, S.
  • Organizer: European Congress of Endocrinology 2009
  • Place of Presentation: Istanbul, Turkey
  • Year and Date: 2009-03-27
• [Book] General and Applied Toxicology III Endocrine Disruption in Toxic Responses (2009)
  • Author(s): Kitamura, S., Sugihara, K., Nakamura, K., Kotake, K., Kashiwagi, A., Fujimoto, N.
  • Total Pages: 44
  • Publisher: John Wiley & Sons, Ltd, Chichester