2009 Fiscal Year Annual Research Report
ポティウイルスゲノム結合タンパク質と宿主タンパク質の相互作用プロファイリング
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20580048
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| Research Institution | St.Marianna University School of Medicine |
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Principal Investigator |
三好 洋 St.Marianna University School of Medicine, 医学部, 講師 (80322519)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
友尾 幸司 大阪薬科大学, 薬学部, 准教授 (70257898)
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| Keywords | シロイヌナズナ / ポティウイルス / 翻訳開始因子 / ゲノム結合蛋白質 |
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| Research Abstract |
本研究課題の目標は分子生物学および構造生物学的な面からのウイルス蛋白質VPgとポティウイルスの病原性との関係の解明である。
これまでに我々は、カブモザイクウイルス(TuMV)のVPgがシロイヌナズナのeIF(iso)4Eと結合し、その結合を介してeIF(iso)4Fとの三者複合体を形成することを明らかとし、VPgのウイルスゲノムRNAの翻訳開始への直接的な関与の可能性を指摘した(Miyoshi et al., Biochimie, 2006)(Khan et al., J.Biol.Chem., 2006)(Khan et al., J.Biol.Chem., 2008)。これらの現象は、このTuMVのVPgとシロイヌナズナのeIF(iso)4Eとの結合が植物RNAウイルスが宿主細胞に侵入して感染を成立させ、植物RNAウイルスの感染増殖過程に関与していることを示唆する。さらに、VPgによる宿主植物細胞の翻訳阻害の可能性について小麦胚芽無細胞翻訳系を用いて検討し、VPgの添加が翻訳効率を低下させることを見出した。この結果は、VPgによる宿主細胞mRNAの翻訳阻害はVPgの翻訳開始因子への結合阻害によるものであることを示している(Miyoshi et al., Biochimie, 2008)。
本研究課題においては昨年度までに、VPgのeIF4Eアイソフォームへの選択性をmRNAキャップ構造への結合の有無の状態で、表面プラズモン共鳴(SPR)法により測定した。その結果、eIF4EアイソフォームのC末端が相互作用に重要であることを報告した(Okade et al., J Biochem. (Tokyo), 2009)。
今年度はVPgの結晶化の検討とウイルスゲノムRNAの翻訳へのVPgの直接的関与の検討に絞って検討を進めたが、残念ながら、芳しい結果を得ることは出来なかった。しかしながら、本研究課題の進行上から得られた技術および知見により学術論文を公開したので、併せて報告させていただきたい。
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