2008 Fiscal Year Annual Research Report
炎症性腸管疾患の脂質およびアポ蛋白代謝機序と質量分析による病態指標検査法の開発
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20590563
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| Research Institution | Shinshu University |
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Principal Investigator |
日高 宏哉 Shinshu University, 医学部, 准教授 (10362138)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
太田 浩良 信州大学, 医学部, 教授 (50273107)
本田 孝行 信州大学, 医学部, 准教授 (80238815)
赤松 泰次 信州大学, 医学部附属病院, 准教授 (80212413)
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| Keywords | 脂質 / リン脂質 / コリン含有リン脂質 / 質量分析 / 酵素法 |
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| Research Abstract |
本年度は健常者における、血漿中脂質、特にコリン含有リン脂質亜分画の測定、脂質吸収と血漿中での代謝、アポ蛋白と一部同様な性質をもち、リポ蛋白と関連するトランスサイレチン(TTR)について蛋白修飾による蛋白の構造と性質の変化について検討した。コリン含有リン脂質亜分画(ホスファチジルコリン スフィンゴミエリン,リゾホスファチジルコリン)は、酵素法を原理として自動分析装置およびマイクロプレート測定装置による分析法を開発し、血漿中および血漿のゲル濾過クロマトグラフィ分画におけるコリン含有リン脂質濃度を、迅速に且つ高感度で高精度に測定できた。脂質負荷試験によるリポ蛋白の血漿中動態を健常人において検討した結果、脂質全体としての濃度的な変化は少なかったが、コリン含有リン脂質組成およびそのリポ蛋白分画、特にHDLの分布に変動が認められ、MALDI-TOF MS質量分析によりコリン含有リン脂質を構成する脂肪酸組成に変化が認められた。また、アポ蛋白においても、部分水解を引き起こす変性が伴う被験者が見いだされた。さらにTTRはアミロイド蛋白の1つであるが、その一部はリポ蛋白に結合して可能性が示唆されたため、TTRの分子変性による物理化学的変化を検討した結果、アミノ酸修飾TTRが物理化学的変化を引き起こすことが見いだされた。同様にしてアポ蛋白におけるアミノ酸修飾分子を検出したところ、血漿蛋白とは異なるパターンを示すことを見いだした。これらから、リン脂質代謝機序およびそれに伴うアポ蛋白変性を分析するプロトコールができた。健常者および炎症性腸管疾患患者の比較検討をおこない、脂質およびアポ蛋白の吸収、分布、異化の検討を行う。
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