OCTNで取り込まれる新規細菌活性物質の腸上皮細胞内動態とMDR1による排出障害

2008 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 20590734
• Research Institution: Asahikawa Medical College
• Principal Investigator: 藤谷 幹浩 Asahikawa Medical College, 医学部, 准教授 (80322915)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 大竹 孝明 旭川医科大学, 医学部, 助教 (10359490)
• Keywords: MDR-1 / OCTN / Bacillus subtilis / Comnetence and soorulation factor / 炎症性腸疾患

Research Abstract

本年度の研究成果を示す.
1. 腸内細菌産生ペプチドの細胞内動態を明らかにする.
バシラス菌由来の腸管保護物質であるcompetence and sporulation factor(CSF)を化学的に合成し,FITC標識を行った. 作製したFITC標識CSFを大腸癌細胞株であるCaco2/bbe cellsに添加した結果, 15分後に細胞質内に取り、こまれた. その後, 30-60分後にその一部は核内に取り込まれていくのが観察された. すなわち, CSFは細胞質内の標的物質と結合する場合と核内へ移行して作用を発揮する場合が考えられた。現在, FITC抗体を用いて細胞内のFITC標識CSFの動態について検討中である.
2. MDR-1による細菌産生ペプチドの排出能を明らかにする.
Caco2/bbe cellsにMR-1 siRNAを導入し, MDR-1 低発現細胞株を作製した. 本細胞株においてMDR-1蛋白発現が低下していることをWestern blotingにて確認した. また, ^3H標識ジゴキシンの排出試験により, MDR-1の魏低下を確認した.本細胞株に対しFITC標識CSFの短時間暴露(15分間)を行った結果, 細胞内のFITCレベルは増加したものの有意ではなかった. 現在, 観察時間などの実験条件の適正化や, 抗FITC抗体を用いた細胞内FITC標的CSFの定量を試みている. 今後さらに, 変異MDR-1の導入によるCSF排出能の変化やin vivoモデルによる検討も行っていく.

Research Products

• [Journal Article] Functional Role of Metaplastic Paneth Cell Defensins in Helicobacter pylori-Infected Stomach (2008)
  • Author(s): Hiroki Tanabe, Tomonobu Sato, Jiro Watari, Atsuo Maemoto, Mikihiko Fijiya, Toru Kono, Toshifumi Ashida, Tokiyoshi Ayabe and Yutaka Kohgo.
  • Journal Title: Helicobactor 13 Pages: 370-379
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Transnasal ultrathin endoscopy for placement of a long intestinal tube in patients with intestinal obstruction (2008)
  • Author(s): Sato R, Watari J, Tanabe H, Fujiya M, Ueno N, Konno Y, Ishikawa C, Ito T, Moriichi K, Okamoto K, Maemoto A, Chisaka K, Kitano Y, Matsumoto K, Ashida T, Kono T, Kohgo Y.
  • Journal Title: Gastrointest Endosc 67(6) Pages: 953-957
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] 腸細胞の有機カチオントランスボーターとその解析法 (2008)
  • Author(s): 藤谷幹浩, 高後裕
  • Journal Title: 分子消化器病 5(3) Pages: 64-72
• [Presentation] microRNA 146 activates NFkB pathway and possibly modulates intestinal inflammation (2009)
  • Author(s): Nata T, Fujiya M, Mizukami Y, Ueno N, Moriichi K, Okamoto K, Ashida T, Kohgo Y.
  • Organizer: 2009 International symposium on Regulatory Peptide
  • Place of Presentation: Tokyo
  • Year and Date: 2009-01-27
• [Presentation] microRNA 146 activates NFkB pathway and possibly modulates intestinal inflammation (2008)
  • Author(s): Nata T, Fujiya M, Mizukami Y, Ueno N, Moriichi K, Okamoto K. Ashida T. Kohgo Y.
  • Organizer: 2nd JUCC(The 2nd Japan & US Collaboration Conference in Gastroenterology)
  • Place of Presentation: Tokyo
  • Year and Date: 2008-11-20
• [Presentation] Effects of Helicobacter pylori Infection On Genetic Instability, Aberrant CpG Island Methylation Status and Cellular Phenotype in Intestinal M etaplasia of Barrett's Esophagus in Japanese Population: A Prospective Follow-Up Study After Eradication (2008)
  • Author(s): Moriichi K, Tanabe H, Maemoto A, Fujiya M, Ashida T, Kohgo Y, et.al.
  • Organizer: DDW 2008 (AGA)
  • Place of Presentation: San Diego(米国)
  • Year and Date: 2008-05-19
• [Presentation] Endoscopic auto fluorescence imaging is useful for detecting colonic small lesions, of lymphoma resembling lymphoid hyperplasia (2008)
  • Author(s): Ueno N, Tanabe H, Maemoto A, Fujiya M, Ashida T, Kohgo Y, et.al.
  • Organizer: DDW 2008 (ASGE)
  • Place of Presentation: San Diego(米国)
  • Year and Date: 2008-05-18
• [Patent(Industrial Property Rights)] 腸管保護剤 (2008)
  • Inventor(s): 藤谷幹浩, 高後裕, 上野伸展, 瀬川修一, 小林直之
  • Industrial Property Rights Holder: 国立大学法人旭川医科大学サッポロビール株式会社
  • Industrial Property Number: 特願2008-22753
  • Filing Date: 2008-09-04