2009 Fiscal Year Annual Research Report
新規抗うつ薬結合蛋白質Dynamin-1過剰発現マウスの抗うつ薬投与後の行動解析
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20591380
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| Research Institution | St.Marianna University School of Medicine |
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Principal Investigator |
長田 賢一 St.Marianna University School of Medicine, 医学部, 講師 (20233504)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山田 光彦 国立精神・神経センター, 精神保健研究所, 部長 (60240040)
喜田 聡 東京農業大学, 応用生物科学部, 教授 (80301547)
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| Keywords | SNRI / dynamin / GTPase |
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| Research Abstract |
プロテオミクス的手法を用い、SNRIであるミルナシプラン結合蛋白質を同定することを目的に、アミド基に結合するアフィニティーカラムを作成し、アフィニティーカラムに結合させた結合蛋白質を高濃度のミルナシプランを添加し、分離抽出した結合蛋白質をCy3蛍光標識した。抗うつ薬を結合させていない対照のアフィニティーカラムからの抽出蛋白質をCy5で蛍光標識し、2D解析システム・バリアブル・イメージアラナイザーを用い解析を行った。このプロテオミクス手法を用いて同定した抗うつ薬結合蛋白質の一つが、dynamin Iであった。Dynaminは細胞膜に存在し、トランスポターを介して、シナプス間隙の神経伝達物質を再吸収し、シナプス小胞の形成に関与する96kDa GTPaseである。Dynamin Iは脳にのみ存在している。また、プレシナプスでの神経伝達物質分泌に関与している重要な蛋白質であることが、近年の研究で証明された。Dynamin Iは開口分泌時のカルシウムのセンサーの働きをしている。
本年はこのdynamin IのGTPase活性と抗うつ薬であるSSRIなど向精神病薬との関係を検討した。dynamin IのGTPase活性をSSRIであるサートラリン、フルボキサミンが著明に抑制することが判明し報告した。フルボキサミンのdynamin Iに対するGTPase活性阻害は、GTPに対しては非競合的阻害であるのに対して、L-phosphatidylserine(PS)に対しては、競合的阻害を示した。一方、サートラリンはGTP、PSに対して混合的阻害を示した。サートラリンはdynamin Iだけでなくdynamin2のGTPase活性の阻害も認めた。またサートラリンによるdynamin Iの阻害にはdynamin I K44Aが関与していることが示された。
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