2009 Fiscal Year Annual Research Report
血清中ヘパラナーゼ測定法の確立と抗ヘパラナーゼ薬による癌転移抑制療法の開発
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20591955
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| Research Institution | University of the Ryukyus |
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Principal Investigator |
青木 陽一 University of the Ryukyus, 医学部, 教授 (40231774)
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| Keywords | ヘパラナーゼ / 抗ヘパラナーゼ抗体 / ELISA / 血清中ヘパラナーゼ値 / 婦人科がん患者 |
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| Research Abstract |
ヘパラナーゼ(Hpa)は、腫瘍細胞の転移・血管新生、さらに転移抑制療法との関連において注目されている。またHpaは分泌蛋白であるため、担癌患者の血清中に検出される。そこで婦人科癌におけるHpaの発現を免疫染色で確認し、癌患者血清中のHpa濃度を測定し、これが臨床病理学的特徴、転移、予後と関連しているかを確認することは非常に意義あることと考える。昨年度は抗Hpa抗体と合成ペプチドを用いたELISAを検討した結果、1)抗原ペプチド濃度として1～100nmol/Lの範囲で定量が可能、2)血漿を用いたELISAも良好な反応を示すことを確認した。
本年度は、血液サンプルでの測定が可能かどうか、Hpaタンパクと血清サンプルを用いた検討を行った。血清サンプル反応性評価検討試験として、抗HPR1抗体と合成ペプチドとの組み合わせで得られた競合法ELISA反応を用いて血清中Hpaの測定を評価検討した。Hpa ELISAキットを用いて血清サンプルの測定を行った結果、良好な添加回収率、希釈直線性が得られた。本キットを用いて血清中のHpaを定量することが可能であると判断した。さらにELISA性能評価試験として、Hpa ELISAキットを用いて性能(同時再現性、特異性)を評価検討した。異なる3濃度のサンプルの測定を行った結果3,10,30nmol/Lの濃度において同時再現性として6.61～13.41%と良好な再現性を示した。臨床検体での測定が可能であると判断した。
平成21年11月本学臨床研究倫理審査委員会での承認を得たので、患者血清での測定を予定している。
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